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血管内皮细胞生长因子反义核糖核酸对肝癌细胞生长的抑制作用

         

摘要

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义RNA转染人肝癌细胞后对细胞体内外生物学性状的影响. 方法将含正义、反义VEGFcDNA序列的质粒PCMV-VEGF、PCMV-FGEV及空载体质粒pcDNA3.1,在脂质体介导下导入SMMC-7721肝癌细胞,分别称为正义、反义及对照组,并通过G418筛选获得阳性克隆.细胞原位杂交和免疫组织化学方法检测转染后VEGF在肝癌细胞内的表达情况;MTT法和FCM检测转染后细胞在体外的增殖和凋亡情况;并制备裸鼠动物模型,观察转染后细胞的体内生长情况. 结果转染PCMV-FGEV后肝癌细胞内VEGF的转录及其蛋白的表达水平显著下降,但转染后体外细胞的增殖与凋亡情况均无明显变化.转染PCMV-FGEV后细胞在裸鼠体内的生长缓慢,反义组成瘤时间为(25.0±1.8)d,明显长于正义组(15.7±2.5)d和对照组(18.5±2.1)d,F=19.455,P&0.01;而平均瘤重以反义组最轻,为(0.96±0.28)g,F=21.501,P&0.01;同时反义组裸鼠肿瘤细胞发生明显的凋亡. 结论 VEGF反义RNA转染人肝癌细胞可抑制肿瘤细胞VEGF的表达,在体外对细胞增殖和凋亡无影响,而体内可显著诱导细胞凋亡并抑制肿瘤生长.

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