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丙型肝炎病毒NS5A对p53活性调控机制研究

         
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目的 研究HCV NS5A对抑癌蛋白p53活性的抑制作用及其作用机制。 方法 采用荧光素酶报告基因系统观察pwwp-luc,pwwp-mut-luc,pc53-NS3及pCNS5A分别转染或共同转染HepG2、Huh7细胞的荧光素酶活性。应用凝胶滞留试验观察HCV NS5A是否影响p53与其特异DNA序列的结合。 结果 内源性p53能激活p21启动子转录功能,使荧光素酶活性明显增加（3.49×10~5与0.60×10~5,t=5.92,P＜0.01）。外源性p53也能激活p21启动子转录功能,荧光素酶活性为5.63×10~5,与对照组（0.47×10~5）比较差异具有显著性（t=10.12,P＜0.01）。HCV NS5A能抑制内源性和外源性p53对p21启动子的激活作用,并呈剂量依赖性（F≥20.71,P＜0.01）。凝胶滞留试验显示HCV NS5A能阻碍p53与其特异DNA序列的结合。 结论 HCV NS5A能抑制p53的反式激活功能使其目的基因p21启动子的转录功能下降,其机制是HCV NS5A能阻碍p53与其特异DNA序列的结合。

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