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激光微切和巢式逆转录聚合酶链反应联合检测单个肝细胞的基因表达

         

摘要

目的 探讨检测单个肝细胞基因表达的方法。方法应用激光微切的方法从冰冻切片上将单个肝细胞切下,提取总RNA,将RNA逆转录成cDNA,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mRNA的表达。结果在显微镜下用紫外激光微切机,将单个肝细胞成功切下,提取RNA后,逆转录成cDNA,巢式RT-PCR的扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见,其表达与细胞数量成正比。结论联合应用激光微切和巢式RT-PCR可以检测单个肝细胞的基因表达。

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