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HBsAg真核表达质粒及其诱导的小鼠特异性免疫应答

         
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目的 研究 ＨＢｓＡｇ真核表达质粒ｐＣＩ—Ｓ和 ｐｃＤＮＡ３．１—Ｓ在真核细胞中的表达和质粒ＤＮＡ的免疫效果。方法 应用基因重组技术构建ＨＢｓＡｇ Ａ核表达质粒ｐＣＩ—Ｓ和ｐｃＤＮＡ３．１—Ｓ；经酶切和测序鉴定无误后，用阳离子脂质体介导的方法将重组质粒转染 ＨｅＰＧ２和 ＣＯＳ—７细胞；４８ｈ后，用 ＥＬＩＳＡ的方法检测重组质粒在细胞中ＨＢｓＡｇ的表达。同时用质粒ＤＮＡ免疫小鼠，用ＥＬＩＳＡ检测免疫小鼠血清抗－ＨＢｓ抗体水平；用乳酸脱氢酶释放法检测小鼠脾细胞 ＨＢｓＡｇ特异性 ＣＴＬ叵应。结果 重组质粒ＤＣＩ—Ｓ和 ｐｃＤＮＡ３．１—Ｓ转染的 ＨｅｐＧ２和 ＣＯＳ—７细胞培养上清液和细胞裂解液中ＨＢｓＡｇ均为阳性；ＤＮＡ免疫小鼠血清可检测到高滴度的抗－ＨＢｓ抗体；免疫小鼠脾细胞可检测到较强的 ＨＢｓＡｇ特异性 ＣＴＬ叵应。结论 ＨＢｓＡｇ 真核表达质粒ｐＣＩ－Ｓ和 ｐｃＤＮＡ３．１—Ｓ可在 ＨｅｐＧ２和 ＣＯＳ－７细胞中高效表达，ＤＮＡ免疫小鼠成功地诱导出抗－ＨＢｓ和ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ反应。

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