抗肝癌人源化单链抗体融合肿瘤坏死因子α的导向作用

孙志伟; 刘彦仿; 袁清安; 俞炜源; 黄翠芬; 马兰花; 于继云

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抗肝癌人源化单链抗体融合肿瘤坏死因子α的导向作用

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目的：获得有临床应用潜力的人源化抗肝癌基因工程双功能抗体。方法：将鼠源性抗肝癌单克隆抗体HAb25的人源化单链抗体（hscFv25）基因与人TNF(基因偶连构建抗肝癌双功能抗体（hscFv25-TNFα），亚克隆入原核GST融合表达载体pGEX 4T-1中，在大肠杆菌中进行表达并纯化目的蛋白。对肝癌SMMC-7721细胞涂片进行间接免疫荧光染色测定纯化后的基因重组双功能抗体蛋白活性。MTT实验测定hscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721杀伤活性。荷肝癌（SMMC-7721）裸鼠体内的初步抑瘤实验检测hscFv25-TNFα的导向治疗效果。结果：hscFv25-TNFα具有与亲本抗体HAb25相同的抗原结合特异性。1h预处理的MTT实验显示，hscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721具有明确的杀伤作用，其IC50值为7.1mg/L，且该杀伤作用可被亲本抗体HAb25所封闭，表明hscFv25-TNFα对靶细胞的杀伤作用是抗体hscFv25介导的选择性杀伤作用。hscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径3.0mm左右的肿瘤具有明确的导向杀伤作用,有效率达到3/3，1/3完全缓解，强于TNFα对照组，该组有效者只有2/3，同时无完全缓解。结论：hscFv25-TNFα是具有一定临床应用潜力的抗肝癌双功能抗体。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2000年第6期||共页
作者
孙志伟; 刘彦仿; 袁清安; 俞炜源; 黄翠芬; 马兰花; 于继云;
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作者单位

北京生物工程所! 北京 100071;

西安第四军医大学病理学教研室;

北京生物工程所! 北京 100071;

北京生物工程所! 北京 100071;

北京生物工程所! 北京 100071;

西安第四军医大学病理学教研室;

西安第四军医大学病理学教研室;

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正文语种 chi
中图分类肿瘤病理学、病因学;
关键词
癌; 肝细胞; 抗体; 双特异性; 肿瘤坏死因子;

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