c—myc特异性核酶抑制肝癌细胞增殖的实验研究

程晋; 赵利军; 惠宏襄; 胡家露; 张学庸; 罗金燕; 王成济

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目的:观察 c-myc 基因特异性核酶对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:计算机辅助设计并合成能特异性切割c-myc mRNA 的锤头状核酶基因,定向克隆于逆转录病毒载体 pDOR。用脂质体（lipofectin）将重组载体 pDOR-RZ 转染HCC9204细胞,G418筛选出阳性细胞。原位杂交和斑点杂交检测核酶在细胞内的表达。用 ABC-ELISA,流式细胞仪和MTT 分别检测转核酶基因肝癌细胞 c-myc 蛋白表达,细胞周期及细胞增殖的改变。电镜观察形态学改变。裸鼠体内致瘤性试验。结果:原位及斑点杂交显示核酶已在肝癌细胞内成功表达。转核酶基因细胞 c-myc 蛋白表达受到抑制。细胞周期显示 G1期细胞增多,S 期细胞减少。MTT 试验显示细胞增殖能力下降。电镜发现细胞空泡变性,染色质凝集成块状。裸鼠体内致瘤率降低,移植瘤生长速度减慢。结论:核酶技术为肿瘤基因治疗提供了一种特异性的新手段。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |1997年第3期|136-138|共3页
作者
程晋; 赵利军; 惠宏襄; 胡家露; 张学庸; 罗金燕; 王成济;
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作者单位

第四军医大学西京医院消化疾病研究中心;

第四军医大学病理教研室;

第四军医大学分子生物学研究所;

第四军医大学西京医院消化疾病研究中心;

第四军医大学西京医院消化疾病研究中心;

西安医科大学第二临床学院消化科;

第四军医大学分子生物学研究所西安 710032;

西安710032;

西安710032;

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正文语种 chi
中图分类肝肿瘤;
关键词
锤头状核酶; c-myc 基因; 逆转录病毒载体; 肝癌细胞;

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