白细胞介素22对乙醛诱导下肝星状细胞增殖活化的影响及其机制

倪雅惠; 霍丽娟; 李婷婷

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目的研究白细胞介素22（IL-22）对乙醛诱导的肝星状细胞（HSC）活化增殖的影响, 并探讨抗氧化轴Nrf2-keap1-ARE在该作用中的地位。方法体外培养HSC-T6, 采用不同浓度（25、50、100、200、400 μmol/L）的乙醛刺激24、48 h后, 四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖率以筛选出最佳造模条件。用最适浓度的乙醛（200 μmol/L）处理HSC-T6 24 h后, 再分别用不同浓度的IL-22（10、20、50 ng/ml）干预24 h, 四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖情况, 同时采用Western blot和免疫细胞化学检测Nrf2、α-平滑肌肌动蛋白的表达情况, 分光光度法检测培养上清液中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量的变化。采用SPSS17.0软件进行统计学分析, 结果以均数±标准差（±s）表示, P＆0.05为差异有统计学意义。多组样本均数的两两比较采用One-way ANOVA分析。结果乙醛刺激后HSC增殖活化明显增强, 以200 μmol/L作用48 h最为明显。加用梯度浓度的IL-22干预后, 表现为剂量依赖性地抑制HSC活化增殖, IL-22 10、20、50 ng/ml组增殖移植率分别为14%、25%、35%（P值均＆0.05）。Western blot和免疫组织化学检测结果均显示各组HSC内Nrf2总蛋白表达无明显差异, 而Nrf2核蛋白在空白对照组表达很少;当乙醛刺激后表达增加（与空白组相比, P＆0.05）, 加用梯度浓度IL-22干预后, Nrf2核蛋白表达进一步增加（P值均＆0.05）。分光光度法显示, 与空白组相比, 乙醛刺激后培养上清液中MDA、GSH水平均升高, 加用梯度浓度的IL-22干预后, MDA水平显著下降, 而GSH水平进一步明显升高（P值均＆ 0.05）, 二者均存在剂量依赖性。结论乙醛诱导HSC活化增殖, 成功建立了酒精性肝纤维化的体外模型;IL-22对乙醛诱导的HSC活化增殖有明显的抑制作用, 其机制可能与促进HSC内Nrf2核转位及下游靶基因GSH表达、增强机体抗氧化轴Nrf2-keap1-ARE的活性有关。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2017年第1期||共页
作者
倪雅惠; 霍丽娟; 李婷婷;
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作者单位

山西医科大学第一医院;

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正文语种 chi
中图分类肝及胆疾病;
关键词
白细胞介素22; 肝硬化; 酒精性; 肝星状细胞; Nrf2; 氧化应激;

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