上皮细胞黏附分子阳性的正常成体小鼠肝祖细胞向肝干细胞转化及HBx蛋白对肝干细胞稳定性的影响

于黎明; 罗娜; 李青岭; 陈姝; 何松

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目的观察上皮细胞黏附分子（EPCAM）阳性的正常成体小鼠肝祖细胞转化为多项分化潜能的肝干细胞, 并探讨HBx蛋白对肝干细胞的影响。方法改良型两步灌流法消化肝组织, 差异性离心法联合密度梯度离心法筛选肝祖细胞;在表皮生长因子和胶原蛋白作用下, 观察肝祖细胞向肝干细胞转化, 并经细胞免疫荧光法鉴定干细胞中CD133、EPCAM、CD49f及细胞角蛋白19表面标志物的表达情况。添加二甲基亚砜,过碘酸雪夫氏染色、细胞免疫荧光、流式细胞术检测干细胞向肝细胞和胆管上皮细胞分化情况。转染HBx蛋白后, PCR检测细胞转染效率, 并观察HBx转染后干细胞形态学差异性及其增殖能力。两组间数据比较采用t检验。结果肝祖细胞存活率为78.67%±4.04%, 在表皮生长因子和胶原蛋白作用下, 铺路石样贴壁生长的肝祖细胞中部分细胞聚集成细胞球, 具有干细胞样性质, 高表达CD133、CD49f、细胞角蛋白19,低表达EPCAM。在二甲基亚砜作用下, 能够向肝细胞和胆管上皮细胞分化。HBx转染后肝干细胞能维持干细胞形态, 克隆能力增强。结论 EPCAM阳性的正常成体小鼠肝祖细胞能够向肝干细胞转化, 同时HBx蛋白对维持肝干细胞的稳定性、促进增殖有重要作用。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2015年第11期||共页
作者
于黎明; 罗娜; 李青岭; 陈姝; 何松;
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作者单位

1. 重庆医科大学附属第二医院消化内科 2. 重庆医科大学附属第一医院重症医学科 3. 重庆医科大学生命科学研究院 4. 重庆医科大学附属第二医院血液科;

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正文语种 chi
中图分类肝及胆疾病;
关键词
肝; 干细胞; 细胞分化; 上皮细胞黏附分子; HBx;

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