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血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导肝星状细胞表达结缔组织生长因子的抑制作用

         

摘要

目的探讨血管紧张素(Ang)(1-7)对AngⅡ诱导的肝星状细胞(HSC)表达结缔组织生长因子(CTGF)的抑制作用及其机制。方法培养人HSC细胞系(LX2细胞),以AngⅡ刺激24 h,分别予以AngⅡ1型受体阻断剂irbesartan、ROCK抑制剂Y27632预处理1 h。设立AngⅡ+Ang(1-7)处理组,观察Ang(1-7)对AngⅡ的抑制作用;Mas受体拮抗剂A779阻断Mas受体,观察对Ang(1-7)抑制效应的阻断作用。利用Western blot、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和多基因定量检测系统检测RhoA、ROCK2 mRNA、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白和mRNA的表达。结果研究结果显示AngⅡ刺激后,RhoA蛋白(0.87±0.093对比0.337±0.074)、ROCK2mRNA(0.747±0.061对比0.163±0.024)、CTGF mRNA(0.578±0.028对比0.262±0.007)相对表达量与对照组相比显著增高,差异有统计学意义(P值均<0.01);irbesartan(RhoA蛋白:0.558±0.030对比0.87±0.093;ROCK2 mRNA:0.368±0.023对比0.747±0.061;CTGFmRNA:0.309±0.019对比0.578±0.028)、Y27632(RhoA蛋白:0.564±0.067对比0.87±0.093;ROCK2 mRNA:0.218±0.046对比0.747±0.061;CTGF mRNA:0.340±0.020对比0.578±0.028)预处理组上述基因或蛋白相对表达量显著减低,差异有统计学意义(P值均<0.01);Ang(1-7)单独处理组RhoA蛋白(0.449±0.035对比0.337±0.074)及CTGF mRNA(0.256±0.008对比0.262±0.007)与对照组相比无明显改变,差异无统计学意义(P值均>0.05);但是Ang(1-7)可抑制AngⅡ诱导的上述基因或蛋白表达的增高(RhoA蛋白:0.615±0.034对比0.87±0.093;ROCK2 mRNA:0.403±0.040对比0.747±0.061;CTGF mRNA:0.265±0.011对比0.578±0.028),差异有统计学意义(P值均<0.01);Mas受体拮抗剂A779可以阻断Ang(1-7)对AngⅡ的抑制作用(RhoA蛋白:0.929±0.076对比0.615±0.034;ROCK2 mRNA:0.720±0.054对比0.403±0.040;CTGF mRNA:0.568±0.029对比0.265±0.011),差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论 AngⅡ通过RhoA-ROCK通路促进人HSC表达CTGF mRNA;Ang(1-7)与其Mas受体结合后对AngⅡ激活的CTGF mRNA的表达具有抑制作用。

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