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巨噬细胞移动抑制因子抗体对HepG2细胞增殖的影响

         

摘要

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)抗体对HepG2细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑盐法检测MIF抗体(50、100、200、400μg/L)对HepG2细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期的变化;免疫组织化学法检测Cyclin D1蛋白表达;Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;酶联免疫吸附法检测MIF抗体对HepG2细胞分泌IL-6水平的影响。结果MIF抗体可以抑制HepG2细胞生长并具有剂量和时间依赖性。MIF抗体可使细胞周期停滞于G0/G1期,不同浓度(0、50、100、200、400μg/L)MIF抗体作用48h后,G0/G1期细胞比例分别为61.34%±1.08%、65.08%±2.71%、71.19%±1.19%、78.39%±1.00%、83.92%±0.51%。不同浓度MIF抗体作用后Cyclin D1蛋白表达率分别为26.06%±0.47%、22.34%±0.75%、18.06%±1.16%、14.03%±0.59%,明显低于对照组(29.51%±1.28%)。不同浓度MIF抗体作用后,VEGF蛋白表达分别为21.22%±0.68%、19.64%±0.54%、18.04%±0.42%、16.59%±0.66%,明显低于对照组(23.23%±0.51%)。MIF抗体对HepG2细胞分泌IL- 6有抑制作用,随着MIF抗体浓度的增加,其IL-6分泌量也相应降低,分别为(210.67±9.31)pg/ml、(181.67±10.05)pg/ml、(160.50±6.60)pg/ml、(143.67±10.56)pg/ml、(118.01±7.48) pg/ml。结论MIF抗体可抑制HepG2细胞的增殖,其可能机制是下调Cyclin D1蛋白的表达,从而阻止其由G0/G1期向S期分化;也可能与其抑制VEGF蛋白的表达、减少IL-6的分泌有关。

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