短发夹状双链RNA抑制丙型肝炎病毒IRES介导的基因表达

陈维贤; 单林娜; 陈娟; 张祯祯; 张秉强; 黄爱龙

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短发夹状双链RNA抑制丙型肝炎病毒IRES介导的基因表达

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目的研究载体表达的短发夹状双链RNA（shRNA）对丙型肝炎病毒（HCV）IRES介导的基因表达的特异性抑制作用。方法构建HCV IRES调控的绿色荧光蛋白表达载体（pIRES-GFP）和虫荧光素酶表达载体（p5’ UTR-Luc）,以及针对HCV IRES的shRNA表达载体（pshRNA-HCV）,共转染HepG2细胞,于转染后24、48,72 h 观察绿色荧光的强弱,用Western blot检测绿色荧光蛋白的表达,半定量逆转录聚合酶链反应法检测GFP的mRNA水平,双荧光素酶系统检测虫荧光素酶活性。结果pshRNA-HCV作用组绿色荧光强度明显弱于未干扰组,GFP蛋白表达量及虫荧光素酶活性降低60％-70％,半定量逆转录聚合酶链反应显示pshRNA-HCV导致了GFP基因mRNA水平的降低。结论针对HCV IRES的shRNA能够显著和特异地抑制该区域调控的蛋白表达水平及mRNA水平,该研究结果为利用RNA干扰技术治疗HCV感染进行了初步探索。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2006年第7期|521-524|共4页
作者
陈维贤; 单林娜; 陈娟; 张祯祯; 张秉强; 黄爱龙;
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作者单位

1. 重庆医科大学病毒性肝炎研究所教育部感染性疾病分子生物学重点实验室 2. 河南平顶山工学院;

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正文语种 chi
中图分类 R373.21;
关键词
肝炎病毒; 丙型; RNA干扰; 基因治疗;

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