导入外源肝细胞生长因子基因对肝细胞增殖的影响

林勇; 谢渭芬; 陈伟忠; 张新; 曾欣; 陈岳祥; 杨秀疆; 张忠兵

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导入外源肝细胞生长因子基因对肝细胞增殖的影响

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目的利用重组腺病毒载体将外源人肝细胞生长因子(HGF)基因导入原代培养的大鼠肝细胞,观察HGF表达对肝细胞增殖特性的影响. 方法同源重组构建表达HGF的复制缺陷型重组腺病毒AdHGF,用其感染原代培养的肝细胞.逆转录聚合酶链反应检测肝细胞HGF和c-met(HGF受体)mRNA的表达;酶联免疫吸附实验测定培养上清液中HGF水平.MTS测定感染前后细胞增殖情况;流式细胞仪测定细胞周期的变化;细胞免疫荧光法检测HGF基因导入后增殖细胞核抗原(PCNA)表达. 结果同源重组获得约4×1010 efu/ml滴度的AdHGF.AdHGF感染原代培养肝细胞后,肝细胞HGF和c-met mRNA表达均明显上调;细胞上清液中HGF分泌水平显著增加,达到(5939.00±414.39)pg/ml(F＝13.661,P＜0.01).细胞增殖能力增强(F≥15.158,P＜0.01),细胞周期由G0/G1期向S期转化(χ2＝41.616,P＜0.01);细胞免疫荧光法提示HGF基因导入后PCNA指数显著提高(F＝42.122,P＜0.01). 结论通过重组腺病毒载体将外源HGF基因导入肝细胞后可维持HGF高效表达并能促进肝细胞增殖,是基因修饰供体肝细胞、增强肝细胞移植治疗效果的有效方法.

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2003年第6期|331-333|共3页
作者
林勇; 谢渭芬; 陈伟忠; 张新; 曾欣; 陈岳祥; 杨秀疆; 张忠兵;
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作者单位

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

上海市国家人类基因组南方研究中心;

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科;

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正文语种 chi
中图分类外科学;
关键词
肝; 细胞; 肝移植; 基因重组; 肝细胞生长因子; 增殖;

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