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人脐血间充质干细胞分离培养方法的优化

         

摘要

目的 探讨人脐血间充质干细胞(MSCs)体外培养纯化的最佳方法,为脐血MSCs在临床的广泛应用奠定基础.方法 无菌条件下采集足月分娩和早产儿脐血,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,比较胎龄、不同培养基、接种密度、首次换液时间对脐血MSCs原代培养过程的影响,通过免疫荧光方法检测表面标记物的表达情况,观察脐血MSCs的生物学特性.结果 足月分娩脐血,采用MesencultTM培养基,以5×106/cm2的密度接种,首次换液时间为7d时,脐血MSCs原代培养成功率较高.相同培养条件下,早产儿脐血培养成功率高于足月分娩脐血.人脐血MSCs强表达CD29、CD44和CD90,不表达造血干细胞表面标志CD34.结论 优化筛选到一种合适的人脐血MSCs培养纯化条件.

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