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激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其免疫学特性研究

         

摘要

目的:研究新克隆的激活素受体相互作用蛋白3(ActRIP3)的免疫学特性和其介导Ser/Thr激酶型受体胞内信号传导的作用.方法:以酵母双杂交法发现的ActRIP基因片段作为探针,从小鼠脑cDNA文库中克隆ActRIP3基因.EIA法分析其与激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)结合能力,Western blot杂交检测成熟蛋白在组织中的表达,免疫组化染色分析其在脑组织中的分布,采用pcDNA-ActRIP3与CAGA-lux报告基因质粒共转染HEK293细胞分析信号传导作用.结果:克隆的ActRIP3基因全长1 197 bp,编码101个氨基酸残基,EIA分析显示ActRIP3与ActRⅡA具有特异性结合作用,这种作用与ActRIP3的N末端氨基酸序列有关.Western blot杂交显示天然ActRIP3相对分子质量约为14 000,在多种组织表达,免疫组化染色显示其在脑组织中的分布以海马及下丘脑为主.通过表达ActRIP3可促进激活素诱导的特异性基因转录活性.结论:ActRIP3属于ActRIP家族新成员,具有特异结合ActRⅡA的能力,并具有促进激活素信号传导的作用.

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