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SMC4在人食管癌组织中的表达及对食管癌细胞增殖、侵袭和转移的作用机制研究

         
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目的:探讨SMC4在人食管癌(EC)组织中的表达及其对EC细胞增殖、侵袭和转移的作用机制.方法:收集2018年5月至2019年4月我院手术切除的EC组织标本及其癌旁正常组织标本各114例,免疫组化法检测人EC组织和正常食管组织中SMC4表达,并分析其与食管癌临床病理学参数的关系,采用细胞转染技术构建稳定下调SMC4的KYSE170和Eca-109细胞(KYSE170-siSMC4组/Eca-109-siSMC4组),以未经处理的 KYSE170和 Eca-109细胞(Control 组)转染 siNC 的 KYSE170/Eca-109细胞(KYSE170-siNC组/Eca-109-siNC组)作为对照,MTT法检测KYSE170和Eca-109细胞增殖;Transwell小室法检测转染后KYSE170和Eca-109细胞侵袭;划痕实验检测转染后KYSE170和Eca-109细胞迁移;IFA检测SMC4对上皮间质转化(EMT)相关分子N-cadherin表达的影响,Western blot检测细胞中PI3K、p-P13K、Akt、p-Ak1蛋白表达.结果:SMC4在食管癌组织中的阳性表达率高于正常食管黏膜组织(P＜0.001);SMC4与肿瘤直径、TNM临床分期、浸润程度、淋巴结转移及组织分化程度密切相关(P＜0.05);与Control组和KYSE170-siNC组相比,KYSE170-siSMC4组细胞在第4、5和6天增殖能力明显下降(P＜0.05),Eca-109-siSMC4组4 d、5 d和6 d增殖能力明显低于Control 组和Eca-109-siNC组(P＜0.05);KYSE170-siSMC4组穿膜细胞数显著少于Control组和KYSE170-siNC组(P＜0.05),Eca-109-siSMC4组穿膜细胞数明显少于Control组和Eca-109-siNC组(P＜0.05);KYSE170-siSMC4组细胞迁移率明显低于Control组和KYSE170-siNC组(P＜0.05),Eca-109-siSMC4组细胞迁移率明显低于Control组和Eca-109-siNC组(P＜0.05);共聚焦显微镜观察发现,下调SMC4后,与Control组和KYSE170-siNC相比,KYSE 170-siSMC4细胞 N-cadherin 表达明显下降(P＜0.05);KYSE170-siSMC4组 p-PI3K 和 p-Akt表达明显低于 Control 组和 KYSE170-siNC组(P＜0.05).结论:下调SMC4表达可抑制人EC细胞增殖、侵袭和转移,并通过降低EMT相关分子N-cadherin表达抑制EMT,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关.

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