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银杏叶提取物对肾间质成纤维细胞中糖基化终产物诱导的血管生成素及其受体表达的影响

         

摘要

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)对肾间质成纤维细胞中血管新生关键调节因子血管生成素(Ang)1、2及其受体酪氨酸激酶受体2(Tie-2)表达的影响,探讨其可能的机制以及抗氧化剂银杏叶提取物(EGb)的干预作用. 方法:选择正常大鼠肾间质成纤维细胞系(NRK-49F)为研究对象,以低糖DMEM培养液培养细胞作对照,分别用含AGEs(400 mg/L)和高糖(25 mmol/L)的DMEM培养液体外培养24h,用抗氧化剂EGb(100 mg/L)预处理后再分别加入AGEs和高糖继续培养.采用实时定量PCR检测Ang-1、Ang-2、Tie-2,核因子κB(NF-κB)及其抑制物(I-κB)mRNA表达水平,Westernblot检测蛋白表达水平.二乙酰二氯荧光素(DCFH)染色后荧光倒置显微镜及流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平. 结果:与对照组相比,AGEs和高糖组细胞内ROS水平明显升高;且Ang-1及NF-κB mRNA和蛋白表达显著增高,I-κB mRNA和蛋白表达显著下降,Ang-2和Tie-2表达则无明显变化.EGb预处理后可降低细胞内ROS水平及Ang-1和NF-κB表达水平,提高I-κB表达水平,而对Ang-2和Tie-2表达无影响. 结论:AGEs可通过增强细胞内氧化应激,抑制I-κB表达而激活NF-κB,上调Ang-1表达.参与糖尿病肾病(DN)血管新生的调控.EGb可通过减少氧化应激,上调I-κB表达,抑制NF-KB途径而下凋Ang-1表达,在防治DN方面有良好的应用前景.

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