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核因子-κB反义寡核苷酸对系膜细胞炎症因子基因表达的影响

         

摘要

目的:探讨NF-κB反义寡核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)对人肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响,为利用NF-κB反义ODN治疗肾小球炎性病变奠定基础. 方法:人工合成p65反义、正义及错配ODN并行全程硫代磷酸化修饰 .应用核酸酶保护法观察阳离子脂质体介导的不同浓度的反义ODN(0.001、0.01、 0.1、1、10 μmol/L)对系膜细胞TNF-α、IL-1α、IL-1β、M CP-1、IL-8、TGF-β1 mRNA表达的影响,以正义ODN(10 μmol/L )及错配ODN(10 μmol/L)作为对照组. 结果:正常培养状态下,系膜细胞可组成型表达TNF-α、IL-1β、IL-8和TGF-β1 mRNA,而不表达IL-1α和MCP-1 mRNA.细菌脂多糖(lipopoly saccharide,LPS)刺激后上述6种炎症因子表达显著上调.p65反义ODN可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞炎性细胞因子TNF-α,IL-α,IL-1 β,MCP-1和IL-8的基因表达,而对TGF-β1无显著抑制作用;p65正义及错配ODN均不能抑制炎性细胞因子的表达. 结论:p65 反义ODN可明显抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达,提示NF-κB在肾小球疾病进展中起关键性调控作用,其反义ODN有可能应用于肾脏病变的实验性治疗之中.

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