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米诺环素抑制卫星胶质细胞激活对于三叉神经痛大鼠模型镇痛机制的研究

         

摘要

目的研究米诺环素通过抑制三叉神经痛大鼠三叉神经节卫星胶质细胞的炎症反应镇痛的机制,为临床三叉神经痛的治疗提供实验支持。方法 (1)采用激光化学诱导三叉神经损伤构建三叉神经痛大鼠模型。将30只SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组,模型组,米诺环素组(50μg米诺环素灌胃7d),每组10只。测定3组大鼠神经颜面部支配区机械痛阈值,检测大鼠三叉神经节内核转录因子-κB(NF-κB)、白介素(IL)-1β的蛋白和mRNA表达,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色观察卫星胶质细胞的激活,同时行NF-κB免疫组织化学染色。(2)采用硝酸甘油构建卫星胶质细胞的炎症模型,体外培养SD大鼠三叉神经部位卫星胶质细胞,将细胞模型分为对照组、模型组、米诺环素低剂量组(15μmol/L)、高剂量组(30μmol/L),检测细胞内IL-1β和NF-κB的表达,Fluo-3/AM探针负载检测卫星胶质细胞中钙离子浓度的变化。结果 (1)米诺环素组的疼痛阈值显著高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。米诺环素组中NF-κB、IL-1β的蛋白水平以及mRNA的表达水平相比模型组显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。NF-κB染色实验中,假手术组NF-KB染色呈弱阳性,模型组呈强阳性,米诺环素组表达较模型组明显减弱。GFAP染色实验中,米诺环素组阳性细胞数明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)米诺环素组细胞IL-1β和NF-κB蛋白及mRNA表达均显著低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。米诺环素组细胞内钙离子浓度明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论米诺环素可以通过抑制卫星胶质细胞的激活,降低炎症因子NF-κB、IL-1β的水平来改善三叉神经痛。

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