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枸杞多糖对氧糖剥夺再灌注损伤后海马神经元凋亡与自噬性死亡的作用

         

摘要

目的探究枸杞多糖(LBP)对原代海马神经元氧糖剥夺再灌注(OGD/R)损伤的保护作用及对细胞凋亡与自噬性细胞死亡的调节作用。方法将原代培养的小鼠海马神经元分为5组,对照组(不做OGD/R处理)、OGD/R组和OGD/R+LBP 15μg/mL组、OGD/R+LBP 30μg/mL组、OGD/R+LBP 60μg/mL组。采用MTT法检测细胞存活率,LDH释放率测定细胞损伤程度,TUNEL染色法检测凋亡率,免疫荧光染色法观察活化型Caspase-3定位,Western blotting法测定蛋白表达量。结果 OGD/R损伤后,细胞存活率显著降低,而不同浓度LBP(15、30、60μg/mL)处理可明显减轻细胞损伤并降低LDH漏出率。TUNEL染色法检测显示OGD/R+LBP 60μg/mL组细胞阳性凋亡数明显降低。免疫荧光染色法和Western blotting结果显示,与OGD/R组相比,OGD/R+LBP 60μg/mL组活化型Caspase-3/Caspase-3比值、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin 1蛋白表达明显减低,Bcl-2/Bax比值、p62蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LBP通过抑制细胞凋亡与自噬性细胞死亡对OGD/R诱导的海马神经元损伤起保护作用。

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