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人脑胶质瘤干细胞SU2耐辐射实验研究

         

摘要

目的探讨人脑胶质瘤干细胞SU2对辐射的耐受性及可能机制。方法 U251细胞常规培养,SU2细胞分别在无血清DMEM/F12培养基、含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中培养后得到悬浮干细胞球(SU2)和贴壁分化细胞(SU2-FBS)。U251、SU2、SU2-FBS接受0、2、10、15 Gy剂量X线照射后24 h流式细胞仪检测侧群细胞(SP)、CD133+细胞比例;接受0、2、4、6、8 Gy剂量照射1周后绘制剂量存活曲线,确定放射敏感性参数,即细胞经2 Gy X线照射后的存活分数(SF2);Ba1b/C裸鼠35只分为SU2干细胞移植组、SU2-FBS移植组、空白对照组,前2组又都分为3个亚组(n=5),分别脑内原位接种受照过0、10、20 GyX线的1×10~6个细胞/5μL SU2干细胞悬液和SU2-FBS细胞悬液,空白对照组注入5μL生理盐水,21 d后解剖取脑,HE染色观察致瘤情况并计算肿瘤体积,免疫组织化学染色检测肿瘤巢蛋白(nestin)、毛细血管扩张性共济失调突变(ATM)蛋白的表达。结果 SU2干细胞中SP、CD133+细胞比例随着辐射剂量的提高而增加,SP细胞从5.63%±0.71%增加到22.05%±3.33%;CD133+细胞由4.60%±0.82%增至17.89%±1.33%,差异有统计学意义(P<0.05);SU2干细胞的生存曲线位于其他细胞的上方,对辐射的抗拒性(SF2=0.71±0.03)比SU2-FBS(SF2=0.54±0.04)和U251(SF2=0.57±0.04)要高,差异有统计学意义(P<0.05)。与0 Gy SU2-FBS移植组比较,0、10 Gy SU2干细胞移植组小鼠移植瘤体积较大,差异有统计学意义(P<0.05),nestin、ATM的阳性表达较强。结论体外培养的胶质瘤干细胞SU2与同类分化细胞SU2-FBS相比具有更强的耐辐射性,这与其高表达ATM有关。

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