特异性小干扰RNA沉默Polo样激酶1基因表达对恶性胶质瘤细胞增殖的影响

范钰; 朱夫; 史德刚

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目的探讨Polo样激酶1（PLK1）基因对胶质瘤细胞增殖的影响和可能机制。方法根据PLK1基因特点,设计并用化学方法合成了5个小干扰核糖核酸分子（siRNA）（P1、P2、P3、P4和P5）。以这5个siRNA转染人胶质瘤TJ905细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测PLK1mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和Western blot方法检测癌细胞增殖和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白水平,用TRAP-ELISA方法检测胶质瘤细胞端粒酶活性。结果所设计的5个siRNA均能明显抑制胶质瘤TJ905细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好。以P4转染处理胶质瘤细胞后与脂质体对照组比较,PLK1基因mRNA水平和蛋白水平明显下调,差异有统计学意义（P均=0.000）。MTT结果显示,与脂质体对照组比较P4 siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制,且呈浓度依赖性（r=0.868,P=0.000）。Western blot结果显示,与脂质体对照组比较P4 siRNA转染组PCNA蛋白水平明显下降,差异有统计学意义（F=181.36,P=0.000）。TRAP-ELISA结果显示,与脂质体对照组比较P4 siRNA转染组胶质瘤细胞端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性（P=0.000）。结论PLK1基因对胶质瘤细胞增殖具有重要的调控作用;以PLK1 siRNA转染处理胶质瘤细胞,可明显抑制胶质瘤细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2009年第1期||共页
作者
范钰; 朱夫; 史德刚;
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作者单位

1. 江苏大学附属人民医院肿瘤研究所 2. 南方医科大学珠江医院肿瘤中心;

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正文语种 chi
中图分类颅内肿瘤及脑肿瘤;
关键词
神经胶质瘤; Polo样激酶1; RNA干扰; 小干扰RNA; 端粒酶;

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