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hTERT介导脐带间充质干细胞实现永生化的研究

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目的通过转染人端粒酶逆转录酶催化亚单位（hTERT）建立永生化脐带间充质干细胞（UCMSCs）,用以获得足够多的UCMSCs满足体外研究与临床需要。方法原代分离培养人UCMSCs,取第4代UCMSCs行流式细胞术检测UCMSCs表面特异标志物表达;利用脂质体介导pLXSN-hTERT正义表达质粒转染UCMSCs,建立永生化UCMSCs;RT-PCR检测转染前后hTERTmRNA表达水平,细胞免疫荧光方法检测hTERT蛋白表达,流式细胞术观察hTERT转染后细胞周期改变。结果流式细胞术结果显示UCMSCs强表达CD29、CD44、CD105,极低表达CD31、CD34、CD45,检测结果符合人UCMSCs特征;RT-PCR检测单纯UCMSCs低表达hTERT mRNA,pLXSN-hTERT正义表达质粒转染后hTERT mRNA表达明显增高;细胞免疫荧光显示hTERT全部表达于细胞核,转染后胞核荧光强度明显增强;细胞周期检测结果显示转染后处于S期UCMSCs数目明显增多,细胞可获得长期稳定传代（＞35代）。结论以hTERT转染UCMSCs在体外可获得长期稳定传代培养细胞,可基本满足体外研究与临床需要。

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来源
《中华神经医学杂志》 |2008年第4期||共页
作者
张赛; 刘振林; 胡群亮; 孙洪涛; 孙世中; 刘晓智;
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作者单位

1. 武警医学院附属医院神经外科 2. 武警部队脑创伤与神经疾病研究所;

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正文语种 chi
中图分类 R329.28;
关键词
脐带间充质干细胞; 端粒酶逆转录酶催化亚单位; 永生化;

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