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可见光照对培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

         

摘要

目的研究可见光照对培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡的影响.方法以白色荧光灯为光源,用5001x、(2 000+-500)1x及(3 400±200)1x不同光照强度,按不同的光照时间(无光照、6、12、24 h)照射培养的人RPE细胞.利用终末脱氧核糖核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labelling,TUNEL)、荧光素标记的连接素V/碘化丙锭(Annexin V-fluorescein isothiocyanate/Propidium iodium,AnnexinV-FITC/PI)双染色流式细胞测定、相差倒置显微镜等手段观察RPE细胞凋亡(分为光照后6、12、24、36 h组).结果可观察到RPE细胞出现两种死亡形式,凋亡与坏死.(1)低于一定阈值(500 1x)的光照对细胞损伤较轻,细胞凋亡及坏死随光照强度的增加而增加.(2)在较短的光照时间(6 h和12 h)内,细胞死亡的增加以凋亡为主;随着光照时间的延长,细胞坏死逐渐明显.(3)随着光照后培养时间的延长,细胞凋亡明显增加(P<0.05).光照后6、12、24 h的损伤改变以凋亡为主,但随时间的延长,凋亡继发性坏死的增加显著.光照后36 h,细胞的坏死数显著增高(P<0.01).结论可见光超过一定照度(5001x)可导致培养的人RPE细胞凋亡及坏死的显著增加,其损伤程度为光照强度及时间依赖性.较低光照强度及较短光照时间主要诱导细胞凋亡,反之则导致细胞坏死.

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