软骨细胞条件性敲除PTEN基因的FGFR3功能增强型点突变小鼠的获得及其表型初步分析

雷子贤; 李福兵; 杜晓兰; 陈林; 戚华兵; 苏楠; 赵子瑜; 陈锚锚; 何启芬; 赵玲; 金旻; 谢杨丽

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目的获得在软骨细胞中条件性敲除PIEN基因的FGFR3增强型点突变小鼠并进行初步表型分析.方法通过FTEN条件性基因敲除小鼠(Ptenflox/flox小鼠),与软骨细胞特异表达Cre重组酶的小鼠(Col2aCre)交配,获得在软骨细胞中特异敲除PTEN基因小鼠(Col2aCre:Ptenfolox/flox);同时,利用Ptenflox/flox小鼠与FGFR3增强型点突变小鼠(Fgfr3G369C/+小鼠,即ACH小鼠)交配,子代杂合子小鼠(Ptenflax/:ACH)之间再交配,获得Ptenflox/flox:ACH小鼠;通过Col2aCre:Ptenflox/flox和Ptenflox/flox:ACH交配即可获得在软骨细胞中特异性敲除PTEN基因的FGFB3增强型点突变小鼠((Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH).采用PCR对小鼠基冈型进行鉴定,免疫荧光染色检测PTEN基因的敲除效率,通过X光平片摄影对小鼠的表型进行初步分析.结果获得了在软骨细胞中敲除PTEN的FGFR3点突变小鼠,免疫荧光染色证实Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠软骨细胞中PTEN蛋白因为基因敲除而表达很低.初步的表型分析显示:Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠身长、尾长均较Pten flox/flox:ACH小鼠长(P＜0.05,n=5).Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠表型,较Ptenflox/flox:ACH小鼠的侏儒表型有所缓解.结论采用基于Cre/LoxP系统的条件性基因敲除策略,获得了在软骨细胞中敲除PTEN基因的FGFR3增强型突变小鼠,表型分析初步显示,软骨细胞特异性敲除PTEN基因可部分缓解由FGFR3增强型点突变所导致的小鼠侏儒表型.该小鼠的获得,为研究P13K/AKT信号通路在FGFR3突变介导的软骨生长抑制中的作用提供了实验动物平台.

著录项

来源
《中国骨质疏松杂志》 |2009年第1期|9-15|共7页
作者
雷子贤; 李福兵; 杜晓兰; 陈林; 戚华兵; 苏楠; 赵子瑜; 陈锚锚; 何启芬; 赵玲; 金旻; 谢杨丽;
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作者单位

400042,重庆,第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战刨伤中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室;

400042,重庆,第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军战刨伤中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类骨发育不良症;
关键词
PTEN; FGFR3; 软骨发育不全; 条件性基因敲除; 小鼠;

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