PTEN

摘要： Our previous studies showed that miR-23b was downregulated in patients with intracerebral hemorrhage(ICH). This indicates that miR-23b may be closely related to the patho-physiological mechanism of ICH, but this hypothesis lacks direct evidence. In this study, we established rat models of ICH by injecting collagenase Ⅶ into the right basal ganglia and treating them with an injection of bone marrow mesenchymal stem cell(BMSC)-derived exosomal miR-23b via the tail vein. We found that edema in the rat brain was markedly reduced and rat behaviors were improved after BMSC exosomal miR-23b injection compared with those in the ICH groups. Additionally, exosomal miR-23b was transported to the microglia/macrophages, thereby reducing oxidative stress and pyroptosis after ICH. We also used hemin to mimic ICH conditions in vitro. We found that phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10(PTEN) was the downstream target gene of miR-23b, and exosomal miR-23b exhibited antioxidant effects by regulating the PTEN/Nrf2 pathway. Moreover, miR-23b reduced PTEN binding to NOD-like receptor family pyrin domain containing 3(NLRP3) and NLRP3 inflammasome activation, thereby decreasing the NLRP3-dependent pyroptosis level. These findings suggest that BMSC-derived exosomal miR-23b exhibits antioxidant effects through inhibiting PTEN and alleviating NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis, thereby promoting neurologic function recovery in rats with ICH.

摘要： 背景:一些研究已经证实了miR-26b、PTEN-PI3K-AKT通路及脂肪酸结合蛋白4在脂肪细胞分化过程中的作用,但其是否存在相互作用以及分子机制尚未见报道。目的:探讨miR-26b通过PTEN-PI3K-AKT通路调控脂肪酸结合蛋白4介导脂肪细胞分化的分子机制。方法:取3T3-L1前脂肪细胞为对照组,分化成熟的3T3-L1细胞为分化组,转染miR-26b inhibitor的3T3-L1细胞为转染组,转染miR-26b inhibitor的3T3-L1细胞再诱导分化成熟为转染分化组。分化组和转染分化组细胞进行油红O染色观察成熟脂肪细胞内脂滴形成情况。荧光定量PCR方法检测4组细胞内miR-26b以及脂肪酸结合蛋白4、PTEN、PI3K、AKT mRNA表达,Western blot方法检测4组细胞内脂肪酸结合蛋白4、PTEN、PI3K、AKT蛋白表达。结果与结论:①miR-26b在3T3-L1细胞分化后表达量明显升高(P0.05),提示3T3-L1细胞分化过程中PI3K-AKT通路激活,脂肪酸结合蛋白4水平升高;③下调细胞内miR-26b水平的分化后细胞较正常分化细胞脂肪酸结合蛋白4、PI3K、AKT mRNA及蛋白表达量减少(P均<0.01),PTEN mRNA及蛋白表达量增高(P均<0.05),提示抑制miR-26b明显促进PTEN mRNA及蛋白表达,从而抑制PI3K-AKT通路,降低脂肪酸结合蛋白4 mRNA及蛋白表达,抑制3T3-L1细胞分化。

摘要： 背景:一些研究已经证实了miR-26b、PTEN-PI3K-AKT通路及脂肪酸结合蛋白4在脂肪细胞分化过程中的作用,但其是否存在相互作用以及分子机制尚未见报道.目的:探讨miR-26b通过PTEN-PI3K-AKT通路调控脂肪酸结合蛋白4介导脂肪细胞分化的分子机制.方法:取3T3-L1前脂肪细胞为对照组,分化成熟的3T3-L1细胞为分化组,转染miR-26b inhibitor的3T3-L1细胞为转染组,转染miR-26b inhibitor的3T3-L1细胞再诱导分化成熟为转染分化组.分化组和转染分化组细胞进行油红O染色观察成熟脂肪细胞内脂滴形成情况.荧光定量PCR方法检测4组细胞内miR-26b以及脂肪酸结合蛋白4、PTEN、PI3K、AKT mRNA表达,Western blot方法检测4组细胞内脂肪酸结合蛋白4、PTEN、PI3K、AKT蛋白表达.结果 与结论:①miR-26b在3T3-L1细胞分化后表达量明显升高(P0.05),提示3T3-L1细胞分化过程中PI3K-AKT通路激活,脂肪酸结合蛋白4水平升高;③下调细胞内miR-26b水平的分化后细胞较正常分化细胞脂肪酸结合蛋白4、PI3K、AKT mRNA及蛋白表达量减少(P均<0.01),PTEN mRNA及蛋白表达量增高(P均<0.05),提示抑制miR-26b明显促进PTEN mRNA及蛋白表达,从而抑制PI3K-AKT通路,降低脂肪酸结合蛋白4 mRNA及蛋白表达,抑制3T3-L1细胞分化.

摘要： 目的探讨H19通过调控抑癌基因PTEN的表达在膀胱癌增殖与迁移中的作用及分子机制。方法采用蛋白免疫印迹和qRT-PCR评估膀胱癌细胞和组织中H19的表达水平。H19对膀胱癌细胞增殖和迁移能力的调控作用分别通过CCK-8实验、克隆形成实验和Transwell实验评估。采用RNA免疫沉淀法和染色质免疫沉淀法证实H19和DNMT1的直接关联及DNMT1在PTEN中的调控机制,MSP实验检测甲基化水平,最终实施挽救实验以阐明H19是否通过抑制PTEN表达介导了膀胱癌细胞的细胞行为。结果qRT-PCR结果显示,H19在膀胱癌组织中的表达较癌旁组织明显增高,同时H19的表达量在晚期膀胱癌组织中明显高于早期膀胱癌。在膀胱癌细胞系中抑制H19的表达能够抑制细胞增殖与迁移。RIP及CHIP实验结果显示,H19通过向PTEN启动子募集DNMT1促进了PTEN启动子的甲基化作用,进一步挽救实验表明抑制PTEN可以部分逆转下调H19导致的细胞增殖及迁移变化。结论H19的高表达通过DNMT1下调PTEN的表达促进了膀胱癌细胞的增殖和迁移潜能。

摘要： 目的:探究姜黄素杀伤HPV阳性宫颈癌细胞的作用机制。方法:采用细胞活性检测实验和细胞凋亡检测实验分析姜黄素对HPV阳性宫颈癌细胞活性以及细胞凋亡的影响;采用实时定量PCR实验和蛋白质印迹(Western blot)法检测姜黄素促进HPV阳性宫颈癌细胞凋亡过程中关键信号通路因子LncRNA MEG3、miR-21、PTEN和活化的caspase3的变化水平。结果:姜黄素显著促进了HPV阳性宫颈癌细胞凋亡,升高了LncRNA MEG3、PTEN和活化的caspase3的表达水平,下调了miR-21的表达(P<0.05);利用siRNA敲低LncRNA MEG3的表达,能够逆转姜黄素对miR-21、PTEN和caspase3的调控(P<0.05)。结论:姜黄素可能通过上调LncRNA MEG3而降低miR-21的表达,从而上调PTEN的表达,最终促进HPV阳性宫颈癌细胞的凋亡。

摘要： Injuries to the central nervous system(CNS)such as stroke,brain,and spinal cord trauma often result in permanent disabilities because adult CNS neurons only exhibit limited axon regeneration.The brain has a surprising intrinsic capability of recovering itself after injury.However,the hostile extrinsic microenvironment significantly hinders axon regeneration.Recent advances have indicated that the inactivation of intrinsic regenerative pathways plays a pivotal role in the failure of most adult CNS neuronal regeneration.Particularly,substantial evidence has convincingly demonstrated that the mechanistic target of rapamycin(mTOR)signaling is one of the most crucial intrinsic regenerative pathways that drive axonal regeneration and sprouting in various CNS injuries.In this review,we will discuss the recent findings and highlight the critical roles of mTOR pathway in axon regeneration in different types of CNS injury.Importantly,we will demonstrate that the reactivation of this regenerative pathway can be achieved by blocking the key mTOR signaling components such as phosphatase and tensin homolog(PTEN).Given that multiple mTOR signaling components are endogenous inhibitory factors of this pathway,we will discuss the promising potential of RNA-based therapeutics which are particularly suitable for this purpose,and the fact that they have attracted substantial attention recently after the success of coronavirus disease 2019 vaccination.To specifically tackle the blood-brain barrier issue,we will review the current technology to deliver these RNA therapeutics into the brain with a focus on nanoparticle technology.We will propose the clinical application of these RNA-mediated therapies in combination with the brain-targeted drug delivery approach against mTOR signaling components as an effective and feasible therapeutic strategy aiming to enhance axonal regeneration for functional recovery after CNS injury.

摘要： 目的明确循环外泌体对高血压的影响,筛选出其中发挥关键作用的miRNA,探索其功能。方法提取自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血浆外泌体注射入正常血压大鼠体内检测大鼠血压的变化;提取高血压患者及SHR血浆外泌体及外泌体RNA,RT-PCR验证挑选的8个miRNAs的表达变化;Western blot的方法检测人脐静结果SHR血浆外泌体可使SD大鼠的血压显著升高。miR-17-5p与miR-218-5p在高血压患者及SHR血浆外泌体(SHR-exos)中的表达明显升高。miR-17-5p抑制剂可以明显减弱SHR-exos升高血压的作用。在体外培养的HUVEC中,miR-17-5p可以下调LKB1和PTEN的表达。结论SHR血浆外泌体可使正常大鼠血压显著升高,miR-17-5p可能是其中发挥关键作用的miRNA。exo-miR-17-5p可能是通过对LKB1/PTEN信号的调控实现促进高血压发生发展作用的。

摘要： 目的:分析20~40岁青年男性运动心率变异与神经内分泌、氧化应激指标的关联性,并探讨PTEN介导的TLR4/NF-κB/NLRP3通路影响高原氧化应激、运动HRV及神经内分泌的机制。方法:以109名世居帕米尔高原高寒地区及113名世居平原20~40岁青年男性为受试者,定量负荷运动后采集HRV时域及频域数据,RIA法及试剂盒法测定血清热休克蛋白(HSP-70)、5-羟色胺(5-HT)、甲肾上腺素(NE)、谷胱甘肽(GSH-px)、一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、皮质醇(COR)和促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度,Western-Bolt检测受试者PTEN及TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关蛋白表达。结果:随年龄上升,世居高原及世居平原受试者血清HSP-70水平呈现上升趋势,血清NE、5-HT、COR及ACTH呈下降趋势;血清GSH-px、ROS及MDA水平随年龄增长呈上升趋势,血清NO及SOD呈下降趋势;心率变异时域及频域指标随年龄增长呈现下降趋势。关联性分析结果表明,世居高原及平原20~25岁组、26~30岁组及36~40岁组受试者运动后RMSSD与ROS存在显著关联(P0.05);各年龄组受试者血清HSP-70与血清ROS均存在显著关联(P<0.05);各年龄组受试者血清HSP-70与运动后RMSSD均存在显著负性关联(P<0.05)。随年龄增长,受试者PTEN及p-PTEN蛋白表达呈下降趋势,TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关蛋白及其磷酸化水平均呈上升趋势。与平原对照组比较,高原低氧能够显著上调受试者血清PTEN蛋白表达并提高其磷酸化水平,同时显著上调TLR4、NF-κB蛋白表达水平。结论:世居高原及平原受试者氧化应激、神经内分泌及运动心率变异存在增龄性特征,PTEN介导的TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路在上述指标的低氧耐受及增龄性发展中发挥作用。

摘要： 背景与目的:胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤。作者既往研究发现circSMARCA5在胃癌中表达降低并能够抑制胃癌进展,但其具体机制目前仍不清楚。本研究探究circSMARCA5抑制胃癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法:采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和transwell实验检测过表达circSMARCA5对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响。通过检测细胞外酸化率、葡萄糖摄取水平和乳酸生成量,分析过表达circSMARCA5对胃癌细胞糖酵解的影响。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测circSMARCA5、miR-4295和PTEN的基因表达,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测GLUT1和LDHA的蛋白水平。建立BACB/c裸小鼠皮下移植瘤模型,观察过表达circSMARCA5对移植瘤生长的影响,利用免疫组织化学方法检测两组皮下瘤中GLUT1、LDHA的表达水平及Ki-67增殖指数。通过双荧光素酶报告基因实验、Pearson相关性分析和RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)实验检测circSMARCA5与miR-4295、miR-4295及PTEN的靶向调控关系。结果:过表达circSMARCA5能够抑制胃癌细胞增殖和侵袭。CircSMARCA5过表达组细胞的糖酵解速率、糖酵解能力值、葡萄糖摄取水平和乳酸生成量均低于对照组。此外,过表达circSMARCA5能够抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长。进一步研究发现,circSMARCA5可发挥分子海绵作用下调miR-4295表达,而miR-4295通过与PTEN mRNA的3′-UTR结合抑制PTEN表达。在circSMARCA5过表达组细胞中上调miR-4295或下调PTEN表达可部分逆转circSMARCA5对胃癌细胞增殖、侵袭和糖酵解的影响。结论:CircSMARCA5通过竞争性结合miR-4295上调PTEN表达,调控细胞糖酵解,从而抑制胃癌细胞的增殖和侵袭。

摘要： 目的探讨Ki-67、肿瘤转移抑制基因23(nm23)和第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)在皮肤黑色素瘤(CMM)中的表达及与淋巴结转移的关系。方法选取2017年1月至2020年1月河南省驻马店市中心医院收治的207例CMM患者,将病灶标本设为研究组,并选取距癌组织3 cm处的癌旁组织作为对照组。比较两组Ki-67、nm23和PTEN的表达水平,分析影响CMM患者淋巴结转移的单因素、多因素。结果研究组Ki-67的阳性表达高于对照组,nm23、PTEN阳性表达低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),临床分期、Ki-67、nm23及PTEN为影响患者淋巴结转移的单因素(P<0.05)。多因素Logistic回归模型分析结果显示,临床分期、Ki-67、nm23和PTEN为影响患者淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05)。结果Ki-67、nm23和PTEN在CMM患者中的表达水平存在差异,通过检测其水平能为临床预后及治疗提供新的思路与依据。

摘要： 癌基因、抑癌基因以及相关基因的异常是胶质瘤发生和侵袭发展的分子基础，近年来，有关胶质瘤的相关基因研究取得了很大的进展。表皮生长因子样结构7基因(Epidermal growthfactor-like domain7，EGFL7)是近年来新发现的编码一类分泌性蛋白的高度保守基因，参与了恶性肿瘤的发生、发展过程并可能在恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted onchromosome ten，PTEN)为新近发现的具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，它不仅表现出抑癌基因的特性，而且还具有磷酸酶活性。现已证实EGFL7、PTEN与多种肿瘤的发生发展密切相关，而关于人脑胶质瘤细胞生长侵袭过程与EGFL7表达、PTEN表达的关系及两者的相关性，目前在国内尚缺少相关方面的报道。

摘要： 癌基因、抑癌基因以及相关基因的异常是胶质瘤发生和侵袭发展的分子基础，近年来，有关胶质瘤的相关基因研究取得了很大的进展。表皮生长因子样结构7基因(Epidermal growthfactor-like domain7，EGFL7)是近年来新发现的编码一类分泌性蛋白的高度保守基因，参与了恶性肿瘤的发生、发展过程并可能在恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted onchromosome ten，PTEN)为新近发现的具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，它不仅表现出抑癌基因的特性，而且还具有磷酸酶活性。现已证实EGFL7、PTEN与多种肿瘤的发生发展密切相关，而关于人脑胶质瘤细胞生长侵袭过程与EGFL7表达、PTEN表达的关系及两者的相关性，目前在国内尚缺少相关方面的报道。

摘要： 癌基因、抑癌基因以及相关基因的异常是胶质瘤发生和侵袭发展的分子基础，近年来，有关胶质瘤的相关基因研究取得了很大的进展。表皮生长因子样结构7基因(Epidermal growthfactor-like domain7，EGFL7)是近年来新发现的编码一类分泌性蛋白的高度保守基因，参与了恶性肿瘤的发生、发展过程并可能在恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted onchromosome ten，PTEN)为新近发现的具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，它不仅表现出抑癌基因的特性，而且还具有磷酸酶活性。现已证实EGFL7、PTEN与多种肿瘤的发生发展密切相关，而关于人脑胶质瘤细胞生长侵袭过程与EGFL7表达、PTEN表达的关系及两者的相关性，目前在国内尚缺少相关方面的报道。

摘要： 癌基因、抑癌基因以及相关基因的异常是胶质瘤发生和侵袭发展的分子基础，近年来，有关胶质瘤的相关基因研究取得了很大的进展。表皮生长因子样结构7基因(Epidermal growthfactor-like domain7，EGFL7)是近年来新发现的编码一类分泌性蛋白的高度保守基因，参与了恶性肿瘤的发生、发展过程并可能在恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted onchromosome ten，PTEN)为新近发现的具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，它不仅表现出抑癌基因的特性，而且还具有磷酸酶活性。现已证实EGFL7、PTEN与多种肿瘤的发生发展密切相关，而关于人脑胶质瘤细胞生长侵袭过程与EGFL7表达、PTEN表达的关系及两者的相关性，目前在国内尚缺少相关方面的报道。

摘要： 目的：观察PTEN编码蛋白对TGF-β1刺激下瘢痕成纤维细胞转分化的抑制作用及其机制。rn 方法：用重组PTEN腺病毒转染体外培养的人瘢痕成纤维细胞,实验分为正常组、TGF-β1刺激组(给予TGF-β1刺激) 、Ad-PTEN+ TGF-β1组(PTEN基因转染后给予TGF-β1刺激) 、空载体（Ad-Laz）+ TGF-β1组(空载体转染后给予TGF-β1刺激)，倒置荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测PTEN mRNA表达，Western blot检测各组中α-SMA、Akt 、p-Akt 表达水平。rn 结果：PTEN基因转染瘢痕成纤维细胞48h后可见明显绿色荧光蛋白表达; PTEN转染组PTEN蛋白及PTEN mRNA表达较正常组及空载体转染组细胞均显著上升(均p0.05) 。rn 结论：PTEN能够抑制TGF-β1诱导的瘢痕成纤维细胞转分化，其机制可能是通过抑制PI3K/Akt通路活化。

摘要： 目的：观察PTEN编码蛋白对TGF-β1刺激下瘢痕成纤维细胞转分化的抑制作用及其机制。rn 方法：用重组PTEN腺病毒转染体外培养的人瘢痕成纤维细胞,实验分为正常组、TGF-β1刺激组(给予TGF-β1刺激) 、Ad-PTEN+ TGF-β1组(PTEN基因转染后给予TGF-β1刺激) 、空载体（Ad-Laz）+ TGF-β1组(空载体转染后给予TGF-β1刺激)，倒置荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测PTEN mRNA表达，Western blot检测各组中α-SMA、Akt 、p-Akt 表达水平。rn 结果：PTEN基因转染瘢痕成纤维细胞48h后可见明显绿色荧光蛋白表达; PTEN转染组PTEN蛋白及PTEN mRNA表达较正常组及空载体转染组细胞均显著上升(均p0.05) 。rn 结论：PTEN能够抑制TGF-β1诱导的瘢痕成纤维细胞转分化，其机制可能是通过抑制PI3K/Akt通路活化。

摘要： 目的：观察PTEN编码蛋白对TGF-β1刺激下瘢痕成纤维细胞转分化的抑制作用及其机制。rn 方法：用重组PTEN腺病毒转染体外培养的人瘢痕成纤维细胞,实验分为正常组、TGF-β1刺激组(给予TGF-β1刺激) 、Ad-PTEN+ TGF-β1组(PTEN基因转染后给予TGF-β1刺激) 、空载体（Ad-Laz）+ TGF-β1组(空载体转染后给予TGF-β1刺激)，倒置荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测PTEN mRNA表达，Western blot检测各组中α-SMA、Akt 、p-Akt 表达水平。rn 结果：PTEN基因转染瘢痕成纤维细胞48h后可见明显绿色荧光蛋白表达; PTEN转染组PTEN蛋白及PTEN mRNA表达较正常组及空载体转染组细胞均显著上升(均p0.05) 。rn 结论：PTEN能够抑制TGF-β1诱导的瘢痕成纤维细胞转分化，其机制可能是通过抑制PI3K/Akt通路活化。

摘要： 目的：观察PTEN编码蛋白对TGF-β1刺激下瘢痕成纤维细胞转分化的抑制作用及其机制。rn 方法：用重组PTEN腺病毒转染体外培养的人瘢痕成纤维细胞,实验分为正常组、TGF-β1刺激组(给予TGF-β1刺激) 、Ad-PTEN+ TGF-β1组(PTEN基因转染后给予TGF-β1刺激) 、空载体（Ad-Laz）+ TGF-β1组(空载体转染后给予TGF-β1刺激)，倒置荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测PTEN mRNA表达，Western blot检测各组中α-SMA、Akt 、p-Akt 表达水平。rn 结果：PTEN基因转染瘢痕成纤维细胞48h后可见明显绿色荧光蛋白表达; PTEN转染组PTEN蛋白及PTEN mRNA表达较正常组及空载体转染组细胞均显著上升(均p0.05) 。rn 结论：PTEN能够抑制TGF-β1诱导的瘢痕成纤维细胞转分化，其机制可能是通过抑制PI3K/Akt通路活化。

摘要： 目的随着分子生物学的发展，越来越多的肿瘤相关基因逐渐被人们发现。Survivin基因足近年发现的一种凋亡抑制基因，在良好分化的正常组织中不表达，但是广泛表达于各种肿瘤组织，是迄今发现最强的凋亡抑制因子，具有极强的抗凋亡作用。PTEN又称为(MMAC1/TEP1)基因，是继p53基因之后在人类肿瘤中缺失和突变率最高的抑痛基因，目前，在肾癌中联合检测Survivin和PTEN蛋白表达及其相关性的报道很少，尚不清楚两种基因及其表达产物在肾癌发生、发展中的协同作用。本实验采用免疫组化的方法检测40例肾癌(RCC)组织中Sur-vivin及PTEN蛋白的表达，初步探讨Survivin蛋白与PTEN在肾痛发病机制中的作用及相互问的关系，为基础研究和临床治疗提供新的思路和依据。方法 用免疫组化S-P法检测40例肾细胞癌、20例癌旁肾组织，5例正常肾组织中PTEN、Survivin蛋白的表达。40例肾癌中，其中男性27例，女性13例；年龄23～74岁，平均53.3岁；透明细胞癌27例，颗粒细胞癌6例，混合细胞癌7例，临床分期(Robson法)：Ⅰ期11例，Ⅱ期14例，Ⅲ期10例，Ⅳ期5例；组织学分级(Fuhrman法)：Ⅰ级9例，Ⅱ级24例，Ⅲ级7例；将表达结果与肾癌细胞学类型、病理学分级、淋巴转移和临床分期等生物学行为进行相关分析。统计分析采用SPSSl3.0软件对数据进行处理，以P0.05)，以及在淋巴结转移组(80.0％)、无转移组(66.7％)间差异亦无统计学意义(P>0.05)；SurviVin蛋白在病理分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中的阳性表达率分别为33.3％，79.2％，85.7％，组间有显著性差异(P0.05)。2.PTEN主要表达在细胞浆中，正常肾组织细胞中PTEN蛋白表达全部为阳性，肾癌癌旁非癌肾组织PTEN蛋白阳性高表达率为95.0％，肾癌组织中阳性高表达率为65·0％，差异具有统计学意义(P0.05)；PTEN在肾癌组织中的蛋白表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小尤明显相关性(P>0.05)。病理学分级Ⅰ-Ⅱ级、Ⅲ级肾癌患者PTEN蛋白阳性表达率分别为72.7％，28.6％，差异有统计学意义(P<0.05)。在有、无淋巴结转移组织中PTEN蛋白的阳性高表达率分别为30.0％和76.7％(P<0.05)；无远处转移肾癌患者PTEN蛋白表达率71.4％，明显高于远处转移肾癌患者20.0％，差异有非常显著性意义(Fisher’S精确概率法P<0.05)。3.40例肾癌组织中，Survivin蛋白表达随临床分期增加而升高(r=O.426，P<0.01)，两者呈正相关；PTEN蛋白表达随肾癌临床分期增加而降低(r=-0.575，P<0.01)，两者呈负相关；Survivin蛋白表达随病理分级增加而升高(r=0.439，P<0.01)，两者呈止相关；PTEN蛋白表达随肾癌病理分级增加而降低(r=-0.352，P<0.05)，两者呈负相关。4.40例。肾癌中PTEN表达阳性高表达组Survivin阳性表达率为57.7％，PTEN低表达组Survivin阳性表达率为92.9％，两者呈负相关(r=-0.366，P<0.05)。结论1.本研究表明：Survivin在肾癌组织中呈高表达，而在正常肾组织中及癌旁组织中无表达；Survivin的表达可能与肾癌细胞类型、淋巴结转移、远转移无关，而与病理分级、临床分期密切相关，在晚期肾癌中的表达高于早中期肾癌，呈正相关趋势，可以作为评价肾癌侵润、进展的指标。2.PTEN蛋白在正常。肾组织中呈强阳性表达，在癌旁及肾痛组织中表达逐渐减低，呈负相关趋势，提示它可能在肾癌的发生发展中起重要抑癌作用，PTEN的表达与肾痛的细胞学类型无关，与肾癌的病理分级及临床分期和淋巴结转移密切相关，可作为判断肿瘤进展及预后的指标。3.Survivin在肾细胞癌中过表达，而PTEN表达减低，Survivin和PTEN的表达呈负相关；Sur-vivin在肾细胞癌发展中起促癌作用，PTEN起抑癌作用，两者在肾细胞癌的发生、发展中具有协同作用。4.通过对Survivin与PTEN蛋白在肾癌中表达的联合检测可更好地评估肾癌的临床生物学行为及预后，二者的联合检测可望成为判断肾癌发展及预后的有用指标。

摘要： 目的随着分子生物学的发展，越来越多的肿瘤相关基因逐渐被人们发现。Survivin基因足近年发现的一种凋亡抑制基因，在良好分化的正常组织中不表达，但是广泛表达于各种肿瘤组织，是迄今发现最强的凋亡抑制因子，具有极强的抗凋亡作用。PTEN又称为(MMAC1/TEP1)基因，是继p53基因之后在人类肿瘤中缺失和突变率最高的抑痛基因，目前，在肾癌中联合检测Survivin和PTEN蛋白表达及其相关性的报道很少，尚不清楚两种基因及其表达产物在肾癌发生、发展中的协同作用。本实验采用免疫组化的方法检测40例肾癌(RCC)组织中Sur-vivin及PTEN蛋白的表达，初步探讨Survivin蛋白与PTEN在肾痛发病机制中的作用及相互问的关系，为基础研究和临床治疗提供新的思路和依据。方法 用免疫组化S-P法检测40例肾细胞癌、20例癌旁肾组织，5例正常肾组织中PTEN、Survivin蛋白的表达。40例肾癌中，其中男性27例，女性13例；年龄23～74岁，平均53.3岁；透明细胞癌27例，颗粒细胞癌6例，混合细胞癌7例，临床分期(Robson法)：Ⅰ期11例，Ⅱ期14例，Ⅲ期10例，Ⅳ期5例；组织学分级(Fuhrman法)：Ⅰ级9例，Ⅱ级24例，Ⅲ级7例；将表达结果与肾癌细胞学类型、病理学分级、淋巴转移和临床分期等生物学行为进行相关分析。统计分析采用SPSSl3.0软件对数据进行处理，以P0.05)，以及在淋巴结转移组(80.0％)、无转移组(66.7％)间差异亦无统计学意义(P>0.05)；SurviVin蛋白在病理分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中的阳性表达率分别为33.3％，79.2％，85.7％，组间有显著性差异(P0.05)。2.PTEN主要表达在细胞浆中，正常肾组织细胞中PTEN蛋白表达全部为阳性，肾癌癌旁非癌肾组织PTEN蛋白阳性高表达率为95.0％，肾癌组织中阳性高表达率为65·0％，差异具有统计学意义(P0.05)；PTEN在肾癌组织中的蛋白表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小尤明显相关性(P>0.05)。病理学分级Ⅰ-Ⅱ级、Ⅲ级肾癌患者PTEN蛋白阳性表达率分别为72.7％，28.6％，差异有统计学意义(P<0.05)。在有、无淋巴结转移组织中PTEN蛋白的阳性高表达率分别为30.0％和76.7％(P<0.05)；无远处转移肾癌患者PTEN蛋白表达率71.4％，明显高于远处转移肾癌患者20.0％，差异有非常显著性意义(Fisher’S精确概率法P<0.05)。3.40例肾癌组织中，Survivin蛋白表达随临床分期增加而升高(r=O.426，P<0.01)，两者呈正相关；PTEN蛋白表达随肾癌临床分期增加而降低(r=-0.575，P<0.01)，两者呈负相关；Survivin蛋白表达随病理分级增加而升高(r=0.439，P<0.01)，两者呈止相关；PTEN蛋白表达随肾癌病理分级增加而降低(r=-0.352，P<0.05)，两者呈负相关。4.40例。肾癌中PTEN表达阳性高表达组Survivin阳性表达率为57.7％，PTEN低表达组Survivin阳性表达率为92.9％，两者呈负相关(r=-0.366，P<0.05)。结论1.本研究表明：Survivin在肾癌组织中呈高表达，而在正常肾组织中及癌旁组织中无表达；Survivin的表达可能与肾癌细胞类型、淋巴结转移、远转移无关，而与病理分级、临床分期密切相关，在晚期肾癌中的表达高于早中期肾癌，呈正相关趋势，可以作为评价肾癌侵润、进展的指标。2.PTEN蛋白在正常。肾组织中呈强阳性表达，在癌旁及肾痛组织中表达逐渐减低，呈负相关趋势，提示它可能在肾癌的发生发展中起重要抑癌作用，PTEN的表达与肾痛的细胞学类型无关，与肾癌的病理分级及临床分期和淋巴结转移密切相关，可作为判断肿瘤进展及预后的指标。3.Survivin在肾细胞癌中过表达，而PTEN表达减低，Survivin和PTEN的表达呈负相关；Sur-vivin在肾细胞癌发展中起促癌作用，PTEN起抑癌作用，两者在肾细胞癌的发生、发展中具有协同作用。4.通过对Survivin与PTEN蛋白在肾癌中表达的联合检测可更好地评估肾癌的临床生物学行为及预后，二者的联合检测可望成为判断肾癌发展及预后的有用指标。

摘要： 本发明提供了一种参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ及其应用，属于功能蛋白质技术领域。参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。PTENγ为新型的PTEN亚型蛋白质，以CUG639为翻译起始点。经蛋白定位实验证明，PTENγ蛋白质分布在细胞核内，且在核仁区有明显富集。构建PTENγ特异性敲除细胞系，发现与野生型对照组相比，该PTENγ特异性敲除细胞系的端粒长度显著缩短，且细胞增殖显著减慢，证明PTENγ发挥参与端粒长度维持的生物学作用。因此，本发明提供了所述PTENγ及其相关基因或重组表达载体在制备抗衰老或治疗肿瘤的药物中的应用。

摘要： 本发明提供了一种N端延长型PTEN亚型PTENζ蛋白及其编码基因和应用，属于功能蛋白技术领域。本发明提供的PTEN亚型是在PTEN蛋白基础上在N端连接有一段28aa的多肽，该多肽为一段高尔基定位信号肽段。PTENζ蛋白的翻译起始于5’‑UTR区域的一个非经典的AUG翻译起始位点‑ATT948，该位点下游的回文结构对翻译起始有重要作用。由ATT948起始翻译得到431个氨基酸序列的蛋白命名为PTENζ。PTENζ主要分布在高尔基体和细胞膜。本发明利用CRISPR‑Cas9特异性敲除Hela细胞中PTENζ，利用RUSH系统证实PTENζ特异性敲除导致内质网向高尔基体的囊泡运输时显著提高转运速度。

摘要： 本发明提供了一种N端延长型PTEN亚型PTENζ蛋白及其编码基因和应用，属于功能蛋白技术领域。本发明提供的PTEN亚型是在PTEN蛋白基础上在N端连接有一段28aa的多肽，该多肽为一段高尔基定位信号肽段。PTENζ蛋白的翻译起始于5’‑UTR区域的一个非经典的AUG翻译起始位点‑ATT948，该位点下游的回文结构对翻译起始有重要作用。由ATT948起始翻译得到431个氨基酸序列的蛋白命名为PTENζ。PTENζ主要分布在高尔基体和细胞膜。本发明利用CRISPR‑Cas9特异性敲除Hela细胞中PTENζ，利用RUSH系统证实PTENζ特异性敲除导致内质网向高尔基体的囊泡运输时显著提高转运速度。

摘要： 本发明提供了一种参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ及其应用，属于功能蛋白质技术领域。参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。PTENγ为新型的PTEN亚型蛋白质，以CUG639为翻译起始点。经蛋白定位实验证明，PTENγ蛋白质分布在细胞核内，且在核仁区有明显富集。构建PTENγ特异性敲除细胞系，发现与野生型对照组相比，该PTENγ特异性敲除细胞系的端粒长度显著缩短，且细胞增殖显著减慢，证明PTENγ发挥参与端粒长度维持的生物学作用。因此，本发明提供了所述PTENγ及其相关基因或重组表达载体在制备抗衰老或治疗肿瘤的药物中的应用。

摘要： 本发明提供了一种具有调控神经系统发育功能的PTEN亚型蛋白PTENδ及其应用，属于功能蛋白技术领域。一种抑癌基因PTEN家族的新亚型蛋白，命名为PTENδ。PTENδ蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，翻译起始密码子为GTG726。PTENδ主要定位于细胞质膜，在小鼠的大脑、小脑、心脏、脾脏、肝脏等神经器官中具有较高的表达量。构建的PTENδ‑/‑的C57BL/6N小鼠模型出现了多动以及社交新奇性丧失的异常行为和精神症状，符合自闭症的表现型，提示PTENδ具有调控神经系统发育的功能。

摘要： 本发明提供了一种融合蛋白，其包含以任意顺序的任选的信号肽、血清白蛋白、任选的连接子、磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）和任选的纯化或可检测标志物，或基本上由其组成，或由其组成。还公开了相关的多核苷酸、载体、宿主细胞、药物组合物和试剂盒。进一步提供了用于递送融合蛋白给对象、治疗癌症或肿瘤、和/或产生融合蛋白的方法。

摘要： 本发明提供了一种特异性抑制PTEN基因的shRNA及应用，属于基因工程和生物医药领域；在本发明中，提供了特异性抑制PTEN基因表达的shRNA序列shPTEN‑1、shPTEN‑2和shPTEN‑3；所述shRNA序列能够使卵巢癌细胞中PTEN基因PTEN mRNA下调，在非治疗与诊断目的的特异性沉默卵巢癌细胞中PTEN基因和制备促进卵巢癌细胞凋亡的基因药物中有着很好的应用。

摘要： 本发明提供了DNA分子、检测人类PTEN基因c.1026+32T>G位点突变的引物，试剂盒及其使用方法，包括用于扩增PTEN基因c.1026+32T>G位点的引物；PCR反应液；本发明还提供了一种检测人类PTEN基因c.1026+32T>G位点突变试剂盒使用方法，可用于快速检测基因PTEN c.1026+32T>G位点突变，可能有助于筛选AD易感人群的分子标志物，对易感个体及其家族成员进行疾病的早期预防、早期诊断及早期治疗具有重要的现实意义。

摘要： 本发明提供一种UBE2S调控PTEN‑AKT信号轴促进HCC化疗耐药原因的验证方法，包括如下过程：验证HCC中UBE2S与耐药通路关系，在HCC细胞中沉默UBE2S，利用RNA‑seq技术和基因富集分析证实UBE2S与耐药通路；验证HCC细胞中UBE2S表达对氟尿嘧啶和奥沙利铂的耐药性；验证转录因子FOXM1与UBE2S表达的相关性；验证FOXM1‑UBE2S下游分子及其调控作用，体内实验和体外实验。本发明验证了在化疗耐药的HCC细胞中存在UBE2S的异常高表达，通过促进PTEN泛素化，降低PTEN蛋白表达水平，调控PI3K‑AKT信号轴影响化疗耐药。实UBE2S作为HCC化疗疗效预测指标、逆转耐药新靶点的潜力，有利于相关研究人员通过克服HCC化疗耐药提高疗效，改善患者的预后。

摘要： 描述了确定PTEN拷贝数量的方法。这些方法可以包括通过数字PCR同时扩增三个或更多个PTEN基因座和两个或更多个参考基因。