囊泡运输相关蛋白VAP-33在小鼠树突状细胞肉瘤细胞株DCS细胞中的表达及其功能

杨振丽; 刘玉琴; 卞晓翠; 顾蓓; 冯海凉; 杨丽娟

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目的探讨囊泡运输相关蛋白VAP-33在小鼠树突状细胞肉瘤细胞株DCS细胞中的表达及其功能。方法用1%TritonX-114提取DCS细胞膜蛋白,用已制备的DCS细胞多克隆抗体（pAb）及蛋白A+G琼脂糖进行免疫沉淀,所得样品利用质谱技术进行分析,检测到VAP-33蛋白在DCS细胞中有表达,继而DCS细胞经不同量抗原（150、850、1500 μl）刺激24、48、72 h后观察细胞形态及吞噬能力的变化,同时通过间接免疫荧光、共聚焦显微镜、Western blot等方法检测了VAP-33的分布及表达变化。0.5 moL/L胰岛素刺激DCS细胞20 min后,采用Western blot检测DCS细胞全蛋白、胞质蛋白、膜蛋白中VAP-33、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）的表达变化,共聚焦方法观察胰岛素刺激前后VAP-33和GLUT-4在DCS细胞中的表达及定位变化。实验中均以常规培养的DCS细胞作为对照。结果 VAP-33蛋白主要表达在DCS细胞膜和胞质中;在外来抗原刺激下,随抗原量的增加及作用时间的延长DCS细胞趋向成熟树突状细胞,VAP-33表达量降低,对辣根过氧化物酶的吞噬能力增强。胰岛素刺激后,VAP-33与GLUT-4有共定位。结论 VAP-33在树突状细胞来源的肿瘤细胞中表达,与树突状细胞的抗原加工有关,在葡萄糖的转运中起一定作用。

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来源
《中华病理学杂志》 |2009年第8期||共页
作者
杨振丽; 刘玉琴; 卞晓翠; 顾蓓; 冯海凉; 杨丽娟;
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作者单位

中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系;

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正文语种 chi
中图分类筋腱、韧带、滑囊疾病及损伤;
关键词
树突细胞; 细胞系; 肿瘤; 抗原呈递; 葡萄糖转运体4型;

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