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沉默lncRNA ANRIL对Ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡相关蛋白的影响

         

摘要

目的:探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA(ANRIL对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡相关蛋白的影响。方法:培养HUVECs,设置空白对照(control)组和不同浓度(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)Ox-LDL诱导组,用RT-qPCR检测ANRIL的表达量。采用小干扰RNA(siRNA)技术沉默ANRIL基因表达,将siANRIL(ANRIL基因沉默组)和siNC(沉默对照组)转入细胞内,培养24 h,再选择最佳Ox-LDL浓度(100 mg/L)干预24 h进行实验。用RT-qPCR检测转染ANRIL干扰片段后人脐静脉内皮细胞中ANRIL表达情况,Western blot检测BAX和BCL-2的相对表达量。结果:Ox-LDL干预组ANRIL表达量较control组显著增高(P<0.05),且随着Ox-LDL浓度增加,ANRIL的表达越高(P<0.05)。转染ANRIL干扰片段后,与control组相比较,Ox-LDL组、Ox-LDL+siNC组和Ox-LDL+siANRIL组ANRIL的表达水平显著上调(P<0.05);与Ox-LDL组比较、Ox-LDL+siANRIL组ANRIL的表达水平显著下调(P<0.05),Ox-LDL+siNC组ANRIL表达未见明显差异;与Ox-LDL+siNC组相比,Ox-LDL+siANRIL组ANRIL的表达水平显著下降(P<0.05)。与control组相比较,Ox-LDL组、Ox-LDL+siNC组和Ox-LDL+siANRIL组BAX上调,BCL-2下调(P<0.05)。同Ox-LDL组比较,OxLDL+siANRIL组BAX下调,BCL-2上调(P<0.05),Ox-LDL+siNC组BAX和BCL-2表达未见明显差异。与Ox-LDL+siNC组相比,Ox-LDL+siANRIL组BCL-2上调,BAX下调(P<0.05)。结论:Ox-LDL可以上调ANRIL的表达量,使内皮细胞功能障碍,导致动脉粥样硬化的发生。沉默lncRNA ANRIL使BAX下调,BCL-2上调,减轻Ox-LDL诱导的HUVECs凋亡,抑制AS的进程。

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