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NKX3.1下调前列腺癌PC-3细胞中抗凋亡基因bcl-2的表达

         

摘要

AIM: To investigate the effect of NKX3. 1 on the gene expression of bcl - 2 and apoptosis in prostate cancer PC -3 cells. METHODS: The eukaryotic expression plasmid pcDNA3. 1 - NKX3. 1 was transiently transfected into PC -3 cells. RT - PCR and Western blotting were used to detect the effects of NKX3. 1 on the expression of bcl -2 gene. Down - regulatory effect of NKX3. 1 on bcl - 2 gene was detected by EMSA. Flow cytometry and apoptotic body staining were carried out to study the effects of NKX3. 1 on apoptosis of PC -3 cells. RESULTS: The mRNA and protein expression of bcl -2 in PC - 3 cells was down - regulated by over - expression of NKX3. 1. The EMSA result showed that NKX3. 1 interacted with the NKX3. 1 binding elements in upstream regulatory region of bcl -2 gene. The results of flow cytometry showed that the number of apoptotic PC - 3 cells increased by 1. 41 - fold after NKX3. 1 transfection to PC - 3 cells. NKX3. 1 increased the apoptotic bodies stained by Hoechst 33258 significantly. CONCLUSION: NKX3. 1 down -regulates the expression of anti - apoptotic gene bcl -2 and induces the apoptosis of prostate cancer PC -3 cells.%目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对bcl-2基因表达以及前列腺癌细胞凋亡的影响.方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1于前列腺癌PC-3细胞中,得到瞬时转染NKX3.1的PC-3细胞,通过RT-PCR和Western blotting方法研究NKX3.1对bcl-2基因的表达的影响,并通过EMSA技术,研究NKX3.1诱导bcl-2基因下调的分子机制;进一步通过流式细胞术、凋亡小体染色等方法研究NKX3.1对细胞凋亡的影响.结果:NKX3.1可明显下调PC-3细胞中bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白的表达;EMSA结果证明NKX3.1可与bcl-2基因上游调控区中的NKX3.1结合元件相互作用;流式细胞术结果显示,PC-3细胞转染NKX3.1后,细胞凋亡数增加了1.41倍;用Hoechst 33258细胞染色发现NKX3.1可使PC-3细胞凋亡小体数量明显增加.结论:NKX3.1可下调抗凋亡基因bcl-2的表达,促进前列腺癌细胞凋亡.

著录项

  • 来源
    《中国病理生理杂志》 |2011年第10期|1902-1906|共5页
  • 作者单位

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

    山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 前列腺肿瘤;
  • 关键词

    NKX3.1蛋白; PC-3细胞; 基因,bcl-2; 细胞凋亡;

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