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人自剪切TRAIL胞外段融合蛋白表达条件的优化

         

摘要

目的:在已构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL) 胞膜外段融合蛋白的原核表达载体基础上,进行表达条件优化,使其高表达为进一步研究其活性奠定基础.方法: 将前期构建的PCS/TRAIL 111-281原核表达载体转入大肠埃希菌BL21中,15% SDS-PAGE比较分析不同诱导剂浓度、诱导温度和诱导时间对融合蛋白表达量的影响.结果: 在诱导温度15℃,加入0.2 mmol/L 诱导剂(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)、诱导过夜时可以获得较高的可溶性融合蛋白表达量.结论: 诱导剂浓度、诱导温度、诱导时间对融合蛋白表达量有较大的影响.

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