目的:探讨caveolin-1在骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用.方法:实验分为未转染组、转染组(转染Rn-caveolin-1-siRNA)、阳性对照组(转染Rn-MAPK-1 control siRNA)及阴性对照组(转染negative control siRNA)4组.采用β-巯基乙醇诱导大鼠MSCs分化为神经细胞.倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况;RT-PCR检测caveolin-1和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)mRNA的表达变化;免疫细胞化学法检测caveolin-1、神经元烯醇化酶(NSE)、神经微丝亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;MTT方法检测细胞存活率.结果:(1)siRNA转染72 h,MSCs荧光表达最强,转染率可达(81.5±2.8)%;而且转染组MSCs的caveolin-1mRNA转录下降(P＜0.05);MTT 提示转染组细胞存活率无显著变化(P＞0.05).(2)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以转染组诱导效果最佳,NSE、NF-M的表达率显著高于其它各组(P＜0.01).(3)随诱导时间延长,各组caveolin-1表达持续增加,诱导6 d达到峰值,与诱导前、诱导6 h相比有显著差异(P＜0.05).此外,转染组与其它各组同时点的caveolin-1表达均显著降低(P＜0.01).结论:以caveolin-1为标记蛋白的脂筏在MSCs诱导分化为神经细胞中可能起到重要的调控作用.
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