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纤维连结蛋白启动子的克隆及转录活性的研究

     

摘要

目的:克隆纤维连结蛋白(FN)启动子和检测其转录活性,并初步研究增加SV40增强子对其转录活性的影响.方法:从正常人gDNA中克隆FN启动子,驱动氯霉素乙酰转移酶报告基因表达,构建成有SV40增强子和无SV40增强子两个重组体报告载体.利用脂质体介导的转染技术导入HT1080细胞,检测各重组体的瞬时表达,确定克隆FN启动子转录活性和SV40增强子对其转录活性的影响.结果:克隆的FN启动子在HT1080细胞中活性比SV40启动子稍强,在加入SV40增强子时活性提高了约6倍.结论:成功的克隆FN启动子,在HT1080细胞中有活性,通过增加SV40增强子能大大提高其活性,为运用FN启动子和特异性靶细胞治疗各种遗传性疾病提供了一定基础.

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