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SOCS3基因对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞原癌基因c-myc mRNA表达及细胞增殖的影响

         

摘要

目的:探讨SOCS3基因对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)原癌基因c-myc mRNA表达及细胞增殖的影响.方法:以脂质体为载体将pEFSOCS3和pSV2neo共转染至体外培养的PASMCs,G418筛选阳性克隆,应用免疫细胞化学法测定转染前后细胞中SOCS3蛋白表达;缺氧处理转染组和对照组PASMCs,采用半定量RT-PCR检测转染前后常氧组、缺氧培养2 h、6 h、12 h、16 h、24h细胞c-myc mRNA表达水平变化;[3H]-TdR掺入法检测转染前后上述各时点细胞增殖情况.结果:免疫细胞化学法证实转染后细胞中有SOCS3稳定表达;半定量RT-PCR结果显示,SOCS3基因转染组细胞c-myc mRNA表达水平在缺氧各时点均显著低于同时点对照组细胞(P<0.01);SOCS3基因转染组细胞在常氧和缺氧各时点[3H]-TdR掺入量显著低于对照组细胞(P<0.01).结论:SOCS3蛋白可能通过下调c-myc基因表达从而抑制缺氧诱导的PASMCs增殖.

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