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ROS介导TGF-β1诱导的大鼠系膜细胞纤维蛋白溶酶活性变化

         

摘要

目的:观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对系膜细胞纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达和纤维蛋白溶酶活性的影响,并探讨反应性氧自由基(ROS)的作用.方法:以体外培养的大鼠系膜细胞为对象,应用TGF-β1刺激,部分实验中应用还原型谷胱甘肽消耗剂BSO[DL-buthionine-(S,R)-sulfoximine]或抗氧化剂NAC(N-acetylcysteine)进行干预处理.应用荧光素法测定细胞产生ROS量;应用Western blot法检测PAI-1蛋白表达;应用RT-PCR和Northern blot检测PAI-1 mRNA表达;应用合成的荧光素纤维蛋白溶解酶底物测定纤维蛋白溶解酶活性.结果:外源性TGF-β1可显著增加大鼠系膜细胞产生ROS,并上调细胞PAI-1蛋白和mRNA的表达以及降低纤维蛋白溶解酶活性;BSO可增强TGF-β1诱导的系膜细胞PAI-1 mRNA的表达;而NAC可显著地逆转由TGF-β1诱导的PAI-1 mRNA表达的上调和纤维蛋白溶解酶活性的下降.结论:TGF-β1可促使系膜细胞产生ROS,ROS作为信号传递分子介导了由TGF-β1诱导的系膜细胞PAI-1表达的上调和纤维蛋白溶解酶活性的下降.

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