牛bFGF-pcDNA3在人脐静脉内皮细胞中的表达及鉴定

曹开源; 崔蕴霞; 徐霖; 郭琳洁; 张胜; 宁波

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牛bFGF-pcDNA3在人脐静脉内皮细胞中的表达及鉴定

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目的:研究牛bFGF-pcDNA3在体外培养人脐静脉内皮细胞中的表达与活性,及对该细胞生物学特性的影响.方法:脂质体法将bFGF-pcDNA3真核表达载体转染体外培养的人脐静脉内皮细胞,经G418筛选阳性克隆.通过免疫细胞化学法检测bFGF的表达部位及Ⅷ因子相关抗原的表达.应用化学发光Western blotting法检测bFGF在转染细胞与未转染细胞中的表达.绘制细胞的生长曲线并计算倍增时间,采用MTT法对bFGF的生物活性进行估计.结果:bFGF-pcDNA3转染人脐静脉内皮细胞后,细胞呈梭形者增多.免疫细胞化学证实转染前后细胞均为血管内皮来源细胞,转染与未转染细胞均在胞浆内表达bFGF.Western blotting证实细胞转染前后均表达17kD bFGF,但转染后表达量增高,细胞生长曲线上移,倍增时间缩短.MTT法证实转染细胞产生的bFGF其生物学活性约相当于持续添加外源性bFGF 571.4 ng/L.结论:转染bFGF cDNA的人脐静脉内皮细胞能在体外增殖,并具有表达与分泌活性bFGF的功能.bFGF-pcDNA3可引起内源性bFGF表达增高,对血管内皮细胞产生相应的生物学活性.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2002年第10期|1228-1232|共5页
作者
曹开源; 崔蕴霞; 徐霖; 郭琳洁; 张胜; 宁波;
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作者单位

中山大学中山医学院免疫学教研室,广东,广州,510089;

暨南大学生命科学院,广东,广州,510632;

中山大学中山医学院免疫学教研室,广东,广州,510089;

中山大学中山眼科中心,广东,广州,510089;

中山大学中山眼科中心,广东,广州,510089;

中山大学中山医学院免疫学教研室,广东,广州,510089;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
成纤维细胞生长因子,碱性; 脐静脉; 内皮细胞;

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