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激光扫描共聚焦显微镜在缺血性心脏病研究中的应用

         

摘要

@@ 激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope, LSCM)是紫外和可见激光双重扫描相结合的显微镜,由于用点光源代替场光源,使探测点与照明点共扼,有效地抑制了同一焦平面上的杂散荧光以及来自非焦平面的荧光,使横向分辨率比普通光学显微镜和荧光显微镜明显升高.它同时具有深度识别能力(最大深度为200-400 μm)及纵向分辨率,因而可以看到较厚的生物标本中的深层的荧光分布细节,可以逐层获得高反差、高分辨率、高灵敏度、无损伤的二维光学切片,从而具有细胞CT的功能.LSCM配有电子摄像和微机数字图象分析系统,可将若干连续的光学切片进行三维重组,沿X、Y、Z轴或任意角度观察标本的外形及剖面,得到其三维立体结构,从而灵活、直观地进行形态学观察,揭示空间关系.LSCM可使用低能量的激光,如双光子激光,对活细胞的毒性很小,因此可用于活细胞定量分析和重复性极佳的荧光定量分析.还可将细胞变成"微小试管”,结合特异的荧光抗体进行一系列的亚细胞水平的结构和功能的研究,是目前先进的细胞形态、功能研究手段[1].

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