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内毒素血症大鼠肠系膜淋巴循环动力学及iNOS抑制剂SMT作用的实验研究

         
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本实验主要研究内毒素、iNOS抑制剂硫酸甲基异硫脲(SMT)对活体淋巴管运动及iNOS的 表达的影响，探讨iNOS、iNOS抑制剂SMT在急性内毒素血症中对淋巴微循环的作用。rn 动物选用雄性Wistar大鼠54只，体重200-300 g。将动物分为3组：control组(n ＝18)：股静脉一次推注生理盐水(5 mL／kg体重)作对照。分别在注药后l、3、6 h 各处死6只；LPS组(n＝18)：股静脉一次推注LPS(5 mg／kg体重)，其它处理同control 组；LPS+SMT组(n＝18)：股静脉一次推注LPS(5　mg／kg体重)和SMT(10　mg／kg体重) ；其它处理 同control组。rn 动物用20％乌拉坦(7 ml／kg体重)肌肉注射麻醉。腹正中部开腹，取出肠系膜，找出一 条理想的游离淋巴管，置于观察盒中，保温(32℃左右)，并定时于肠管上滴加37℃左右的台 氏液以维持一定湿度，在倒置显微镜下观察并录像。将每只需观察6 h的动物镜下先稳定5 -10 min，作为正常录像，再按分组注药，观察录像6 h后，处死。rn 根据录像资料，利用微机图像处理系统，定淋巴管、定部位测量实验用药前及用药后l 、2、3、4、5、6 h各时段各动物淋巴管管径的大小，求得平均口径(d)、最大舒张口径(b )、最小收缩管径(c)、淋巴管收缩频率(a)，计算淋巴管运动指数［收缩指数Index I＝(b 2-c2)／b2，总收缩活性指数IndexII＝(b2-c2)a／b2，淋巴管动力学指数LD-Ind ex＝(b-C)100 a／d2］。rn 所有动物在处死后，取血静置，取血清，用一氧化氮试剂盒测定血清中NO合量。并取肠 系膜进行免疫组化染色。rn 结果：(1)LPS组的收缩频率、运动指数均比注药前显著降低(P＜ 0.05)，免疫组化染色阳 性细胞数明显增多(P＜0.05)。阳性细胞为巨噬细胞和内皮细胞。血浆NO合量显著升高 (P＜0.01)。(2)SMT+LPS组的收缩频率、运动指数均与注药前相比，无显著差异( P＞0.05) 。免疫组化染色阳性细胞数及血浆NO含量与LPS组相比，均显著降低(P＜0.01)。rn 结果说明：正常条件下，肠系膜淋巴管运动不但受自身节律的调节， 还受NO的调节。LP S作用下，肠系膜淋巴管随时间延长明显扩张，运动减弱，渗出增多，与NO的生成量呈正相 关。SMT能抑制iNOS的活性，内毒素血症早期应用选择性iNOS抑制剂，可维持淋巴循环于正 常水平。内毒素血症中，由于iNOS过度表达，导致过量的NO产生，使淋巴管的运动异常。SMT由于能 抑制iNOS，从而抑制了NO的过量产生，使淋巴管运动恢复。这可能为临床上淋巴管循环障碍 及内毒素血症的治疗提供理论基础和实验依据。

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