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HL-60细胞中IL6基因的克隆及鉴定

         

摘要

目的: 为探索性构建重组人白细胞介素6-绿脓杆菌外毒素融合蛋白(IL6-PE40)以选择性杀伤高表达IL6受体(IL6R)的白血病细胞,本研究试图从人急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)中克隆N-末端缺失24个氨基酸的人IL6基因(IL6 cDNA)并构建含此基因的重组质粒.方法:根据IL6基因序列设计合成可扩增IL6cDNA的特异性引物;利用基因重组技术,构建含IL6基因的重组质粒pUC-IL6.结果与结论:本文首次从HL-60中扩增出预期480 bp的IL6 cDNA,将其克隆至pUC18质粒中,命名为pUC-IL6,并经EcoRI/BamHI双酶切电泳及序列分析鉴定加以确证,为进一步构建重组人IL6-PE40奠定了坚实基础.

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