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人类心脏发育相关基因的初步筛选

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摘要

目的:从人胎儿心脏cDNA文库和成人心脏cDNA文库,通过差减杂交,筛选心脏发育相关基因.方法:①用23周和27周的人胚胎心脏组织构建2个cDNA文库,分别命名为LibF和LibS,用成人心脏组织构建了1个cDNA文库,命名为LibA.②探针的合成、纯化和比放射活性测定.③差减杂交和特异性探针的富集.④菌落原位杂交.⑤差减阳性克隆的斑点杂交.结果:①所构建的人胎儿心脏cDNA文库和成人心脏cDNA文库的容量LibF为1×109 ,LibS为3.7×108,LibA为2×108, 重组子的片段大小为0.9～4.6 kb.②经差减杂交和原位杂交,获得有差异克隆48个.结论: 构建高质量的人胎儿心脏cDNA文库和成人心脏cDNA文库为筛选心脏发育相关基因奠定可靠的基础,并初步说明随着发育过程的推移,整体基因的表达有逐步减少的趋势.

著录项

来源
《中国病理生理杂志》 |1999年第9期|784-788|共5页
作者
刘兰英; 顾军; 汤建; 马涧泉;
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作者单位

中山医科大学分子医学研究中心,广州,510089;

中山医科大学分子医学研究中心,广州,510089;

中山医科大学分子医学研究中心,广州,510089;

北京医科大学基础心血管研究所;

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正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
RNA,信使; 脱氧核糖核苷类; 杂交; 心脏;

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