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下调TPD52基因表达通过Wnt信号通路对子宫肌瘤细胞活力、凋亡及TNF-α和IL-6表达的影响

         

摘要

目的:探讨下调肿瘤蛋白D52(TPD52)基因表达通过Wnt信号通路对子宫肌瘤细胞活力、凋亡及肿瘤坏死因子 α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响.方法:将针对TPD52的特异性siRNA(si-TPD52)及其阴性对照转染原代培养的子宫肌瘤细胞,并加入Dickkopf-1(DKK1)作为Wnt信号通路抑制剂,转染48 h后,用Western blot检测TPD52及Wnt信号通路关键分子 β-catenin和相关靶蛋白cyclin D1和survivin的蛋白表达;MTT及流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡率的变化;RT-qPCR检测TNF-α和IL-6的mRNA表达.结果:TPD52在转染si-TPD52的子宫肌瘤细胞的表达显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);与阴性对照组比较,si-TPD52组细胞活力明显受到抑制,凋亡率增加,TNF-α的mRNA表达降低,IL-6的mRNA表达升高,β-catenin、cyclin D1和survivin的蛋白表达降低(P<0.05);加入DKK1后si-TPD52对细胞活力和凋亡的影响更明显.结论:下调TPD52基因表达可通过Wnt信号通路抑制子宫肌瘤细胞生长和诱导凋亡,同时下调TNF-α和上调IL-6表达.

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