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siRNA敲减缺氧诱导因子1α表达对口腔鳞癌细胞活力及癌胚抗原相关细胞黏附分子1表达的影响

         

摘要

目的:探究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与口腔鳞癌细胞活力和凋亡的关系以及作用机制.方法:采用RT-PCR和Western blot检测口腔鳞癌细胞系Tca8113和CAL27以及正常口腔上皮细胞NOK中HIF-1α和癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)的mRNA和蛋白表达量;RNA干扰技术沉默口腔鳞癌CAL27细胞中HIF-1α的表达,实验分为空白对照组、无义对照组和siRNA-HIF1-α组,MTT实验检测敲减HIF-1α表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western blot检测HIF-1α、P21、血管内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2和Bax的蛋白水平.结果:HIF-1α和CEACAM1在口腔鳞癌细胞中的表达量显著高于正常口腔细胞(P<0.05),且二者表达量呈正相关;HIF-1α和CEACAM1在CAL27细胞中的表达量显著高于Tca8113细胞(P<0.05).siRNA-HIF-1α组细胞中的HIF-1α蛋白表达量显著低于空白对照组(P<0.05).敲减HIF-1α表达显著抑制CAL27细胞的活力(P<0.05),促进其凋亡(P<0.05),显著增加P21和Bax的蛋白水平(P<0.05),明显降低VEGF和Bcl-2的蛋白水平(P<0.05).结论:HIF-1α在口腔鳞癌中高表达,干扰HIF-1α的表达可显著抑制细胞的活力,促进其凋亡.这可能是通过调控HIF-1α下游靶基因的表达以及肿瘤血管的生成来发挥作用的.

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