紫草素通过PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡和自噬

WANG Shu-hui; YIN Xiu-yan; LIU Hai-ying; ZHANG Ya-nan

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目的:观察紫草素(shikonin)对人宫颈癌HeLa细胞凋亡(apoptosis)和自噬(autophagy)的影响,并初步探讨PI3K/Akt/mTOR信号通路在其中的可能作用.方法:以紫草素作用于HeLa细胞后,采用CCK-8检测细胞活力;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;GFP-LC3质粒转染HeLa细胞后观察自噬小体;紫草素分别与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)和凋亡抑制剂Z-DEVD-FMK共同作用后,Western blot分析检测细胞内自噬和凋亡相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和cleaved caspase-3表达的变化,并检测PI3K/Akt/mTOR信号通路中磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达的变化.结果:紫草素显著抑制HeLa细胞活力(P<0.05).与对照组比较,紫草素可诱导HeLa细胞凋亡(P<0.05).GFP-LC3质粒转染分析结果显示,HeLa细胞经紫草素作用后,细胞质中出现绿色点状聚集的自噬小体,而对照组细胞中极少观察到点状聚集的自噬小体形成.与紫草素组比较,紫草素+3-MA组中LC3-II/LC3-I显著降低,而cleaved caspase-3表达显著升高(P<0.05);与紫草素组比较,紫草素+Z-DEVD-FMK组LC3-II/LC3-I显著升高,而cleaved caspase-3表达显著降低(P<0.05).与对照组比较,紫草素可使p-PI3K、p-Akt和p-mTOR表达明显降低(P<0.05).结论:论紫草素能诱导HeLa细胞凋亡和自噬,且其凋亡及自噬具有协同作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2019年第7期|1189-1194|共6页
作者
WANG Shu-hui; YIN Xiu-yan; LIU Hai-ying; ZHANG Ya-nan;
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作者单位

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正文语种 chi
中图分类肿瘤病理生理学;子宫肿瘤;
关键词
KEYWORDS紫草素; 宫颈癌; 细胞凋亡; 自噬; PI3K/Akt/mTOR信号通路;

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