lncRNA FEZF1-AS1调控miR-363-3p影响LPS诱导的血管内皮细胞活力及凋亡

张思敏; 杜文辉; 王敏; 陈芬; 蔡小芳

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目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)FEZF1-AS1调控微小RNA-363-3p(miR-363-3p)影响脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞活力及凋亡的作用机制.方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),分别将pcDNA-NC、pcDNA-FEZF1-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-363-3p、miR-NC及miR-363-3p mimics转染至HUVECs,并给予LPS刺激24 h;采用RT-qPCR检测FEZF1-AS1和miR-363-3p的表达量;MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双萤光素酶报告基因实验验证FEZF1-AS1与miR-363-3p的靶向调控作用;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cleaved caspase-3和Ki67的表达量.结果:与control组比较,LPS组FEZF1-AS1的表达水平显著降低(P<0.05),miR-363-3p的表达水平显著升高(P<0.05);与pcDNA-NC+LPS组比较,pcDNA-FEZF1-AS1+LPS组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),cyclin D1和Ki67蛋白水平显著升高(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC+LPS组比较,anti-miR-363-3p+LPS组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),cyclin D1和Ki67蛋白水平显著升高(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05);双萤光素酶报告基因实验证实FEZF1-AS1可靶向结合miR-363-3p;与miR-NC+pcD?NA-FEZF1-AS1+LPS组比较,miR-363-3p+pcDNA-FEZF1-AS1+LPS组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),cyclin D1和Ki67蛋白水平显著降低(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05).结论:过表达FEZF1-AS1可抑制miR-363-3p表达从而降低LPS诱导的血管内皮细胞凋亡率,增加其细胞活力.

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来源
《中国病理生理杂志》 |2020年第11期|1945-1951|共7页
作者
张思敏; 杜文辉; 王敏; 陈芬; 蔡小芳;
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作者单位

华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院急诊科湖北武汉430022;

华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院急诊科湖北武汉430022;

华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院急诊科湖北武汉430022;

华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科湖北武汉430022;

华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院急诊科湖北武汉430022;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类发病学;细胞生理学;
关键词
长链非编码RNA; FEZF1-AS1; 微小RNA-363-3p; 脓毒症; 血管内皮细胞; 细胞活力; 细胞凋亡;

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