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巨噬细胞分泌转化生长因子β对百草枯中毒致肺纤维化的影响

         
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摘要

目的 研究巨噬细胞参与百草枯(PQ)致肺纤维化可能的作用机制.方法 用佛波酯(PMA)320 nmol·L-1诱导THP-1细胞24 h获得巨噬细胞.检测PQ 20,40,60,80,100,120,140,160和180μmol·L-1染毒该巨噬细胞48 h,CCK-8法检测细胞存活率.用Transwell技术构建该巨噬细胞和人胚肺成纤维细胞MRC-5共培养体系,PQ 100μmol·L-1染毒48 h建立肺纤维化细胞模型;染毒同时加入转化生长因子β(TGF-β)受体抑制剂GW78838810μmol·L-1抑制TGF-β受体,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞和MRC-5细胞TGF-βmRNA表达,Western印迹法检测巨噬细胞TGF-β蛋白、MRC-5细胞纤维化相关蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤连蛋白及TGF-β/Smads通路相关蛋白Smad2和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,免疫荧光法检测MRC-5细胞纤维状肌动蛋白表达.结果 PQ在20～180μmol·L-1浓度范围内可抑制巨噬细胞存活,IC50为57.13μmol·L-1.与细胞对照组相比,PQ染毒组巨噬细胞TGF-βmRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05);与MRC-5细胞相比,巨噬细胞在PQ染毒前后TGF-βmRNA均显著增加(P<0.05).PQ染毒共培养体系48 h,MRC-5细胞Smad2和MMP-9蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01),α-SMA和纤连蛋白显著增加(P<0.01);与PQ染毒组相比,GW788388处理可显著降低MRC-5细胞Smad2和MMP-9蛋白表达(P<0.05)及α-SMA和纤连蛋白表达(P<0.05,P<0.01).免疫荧光染色结果表明,与PQ染毒组相比,GW788388处理后MRC-5细胞纤维状肌动蛋白表达显著降低(P<0.01).结论 PQ染毒共培养体系后,巨噬细胞可能通过旁分泌TGF-β激活肺成纤维细胞TGF-β/Smads通路而促进肺纤维化.

著录项

  • 来源
    《中国药理学与毒理学杂志》 |2021年第4期|283-289|共7页
  • 作者

    孙阳阳; 骆媛; 王永安; 王倩; 孙明尧; 王小宁; 刘凤英; 王帅; 杨维杰; 王道辉; 张敏敏;

  • 作者单位

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    中国人民解放军96604部队医院药剂科 甘肃 兰州 730030;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

    军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所 抗毒药物与毒物学国家重点实验室 北京 100850;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 生化药理学;其他;
  • 关键词

    百草枯; 肺纤维化; 巨噬细胞; 转化生长因子β; Smads; 信号通路;

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