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何首乌与制何首乌对人尿源性干细胞的作用差异及机制研究

         

摘要

目的 以人尿源性干细胞(human urine-derived stem cells,hUSCs)为研究对象,探究何首乌(Polygoni Multiflori Radix,PMR)与制何首乌(Polygoni Multiflori Radix Praeparata,PMRP)对人成体干细胞的作用差异及机制.方法 利用高效液相色谱法对何首乌水提物(PMR)与制何首乌水提物(PMRP)中主要活性成分大黄素(emodin,EM)和二苯乙烯苷(2,3,5,4'-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glycoside,TSG)进行定量分析;MTT法研究PMR及PMRP对hUSCs活力的影响;根据EM和TSG在2种水提物中的含量和比例,比较单成分及2种成分按比例联用对hUSCs活力的影响;流式细胞术检测hUSCs细胞周期和细胞凋亡,Wes-tern blot检测细胞周期相关蛋白的表达.结果 PMR中TSG和EM的含量分别为77.68、0.53 mg/g,PMRP中TSG和EM的含量分别为29.37、0.36 mg/g;0.5、1.0 mg/mL浓度的PMR对细胞有明显毒性,相同剂量下,PMRP促进细胞增殖;0.5~4μmol/L EM促细胞增殖,320、640μmol/L TSG抑制细胞活力;按1:160(约为PMR比例)和1:80(约为PMRP比例)联用后对细胞活力的抑制作用较单用显著增加;PMR组及1:160联用组细胞周期出现G0/G1期阻滞,且细胞凋亡率较PMRP组及1:80联用组高;Western blot结果显示,PMR组中细胞p21水平上调;CDK1、CDK2及Rb磷酸化水平降低,而PMRP组呈相反趋势.结论 相同条件下,PMR较PMRP表现明显细胞毒作用,而PMRP表现促细胞活力作用,说明EM与TSG比例的改变可能是何首乌炮制减毒的机制之一.

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