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鸡毒支原体S6株P25蛋白粘附特性的研究

         

摘要

鸡毒支原体(MG)粘附蛋白是MG定植于宿主细胞表面的关键因子,并在MG致病过程中发挥着重要作用.为筛选并鉴定MG新的粘附蛋白,本研究根据生物信息学软件对MG S6基因组全部序列进行分析,选取了MG的一个假定膜蛋白基因,其大小为675 bp(编码225个氨基酸,分子量约25 ku,将其命名为P25).通过MG膜蛋白组分的提取及western blot鉴定,结果显示P25分布在MG膜的表面.利用PCR扩增MG p25基因并通过定点突变将其序列中TGA终止密码子突变为TGG(编码色氨酸),通过原核表达其编码的重组P25蛋白(rP25),并以rP25作为免疫原免疫兔子制备高免血清.激光共聚焦显微镜观察显示rP25和MG均对鸡胚成纤维细胞系(DF-1)具有明显的粘附作用,而ELISA和流式细胞仪检测结果则表明rP25和MG对DF-1细胞的粘附为特异性粘附,其中rP25抗血清可以明显抑制rP25和MG对DF-1细胞的粘附作用,从而证明P25为MG的一个粘附相关蛋白.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2016年第2期|105-110|共6页
  • 作者单位

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

    吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;

    东北农业大学资源与环境学院,黑龙江哈尔滨150030;

    东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;

    吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;

    中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病创新团队,黑龙江哈尔滨150001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 霉形体(支原体);
  • 关键词

    鸡毒支原体; DF-1细胞; 激光共聚焦; ELISA; 流式细胞仪;

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