东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立与初步应用

郑小龙; 王群; 孙涛; 孙明君; 张晓文; 朱来华; 梁成珠

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东方马脑脊髓炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立与初步应用

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为建立检测东方马脑脊髓炎病毒(EEEV)的方法,本研究利用PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),针对EEEV NS1基因,设计特异性引物,通过优化反应条件,对核酸扩增产物采用DHPLC进行检测分析,核酸扩增产物形成DHPLC特征峰图,建立了EEEV的PCR-DHPLC快速检测方法.结果显示该方法与其他6种常见马病病毒均无交叉反应,未检测到其他马病病毒的阳性吸收峰,具有较强的特异性;对梯度稀释的标准阳性模板的检测限可达到10拷贝/μL;利用本研究建立的方法与荧光定量RT-PCR对30份临床样品进行检测,两者符合率达100％.本研究建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可以用于EEE的病原学诊断及流行病学调查.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2016年第8期|638-641|共4页
作者
郑小龙; 王群; 孙涛; 孙明君; 张晓文; 朱来华; 梁成珠;
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作者单位

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

山东出入境检验检疫局,山东青岛266002;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
东方马脑脊髓炎; 变性高效液相色谱; RT-PCR; 荧光定量PCR;

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