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猪博卡病毒PCR检测方法的建立及初步应用

         

摘要

为建立能够检测猪博卡病毒(PBoV)所有基因型的检测方法,本研究根据PBoV每个基因群(G1、G2和G3)的保守区域设计特异性引物,建立了检测PBoV的PCR方法.特异性试验结果显示除PBoV外,其它猪病病原核酸扩增均呈阴性,具有较强的特异性;对pMD-GD6、pMD-GD 18和pMD-GD4的最低检测限分别为4.64×103拷贝/μL、5.29×103拷贝/μL和1.16×103拷贝/μL,敏感性较高;采用该方法对39头份猪的肝脏、肺脏、脾脏和小肠内容物进行检测,阳性率为74.4%(29/39).其中G1群PBoV的检出率最高,G2群检出率最低;G1群和G3群在4种样品中均有检出,G2群只在小肠内容物中有检出;同时本研究首次在肝脏中检出该病毒.本研究结果表明,PBoV感染情况复杂,存在多基因型的混合感染.本研究为进一步对病毒进行基因分型和致病性研究提供检测依据.

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