鳜鱼传染性脾肾坏死病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

安伟; 肖雨; 张崇文; 张明辉; 何正侃

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鳜鱼传染性脾肾坏死病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

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为了建立检测鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的方法,本研究根据GenBank中ISKNV MCP基因的保守序列设计并合成1对引物和1条TaqMan探针,建立了该病毒的TaqMan荧光定量PCR检测方法.结果表明,以重组质粒标准品构建的标准曲线的相关系数为0.994,具有良好的线性关系,检测下限为20拷贝/μL,是常规PCR的1 000倍;特异性强,只有ISKNV呈阳性,而与流行性造血器官坏死病毒、鲤春病毒血症病毒和草鱼呼肠孤病毒均无交叉反应;重复性好,批内和批间的变异系数均小于0.7％.本研究建立的ISKNV TaqMan荧光定量PCR方法对ISKNV的快速检测及定量检测具有重要意义.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2014年第3期|214-217|共4页
作者
安伟; 肖雨; 张崇文; 张明辉; 何正侃;
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作者单位

上海市水产研究所上海市水生动物疫病预防控制中心,上海200433;

上海市水产研究所上海市水生动物疫病预防控制中心,上海200433;

上海市水产研究所上海市水生动物疫病预防控制中心,上海200433;

上海市水产研究所上海市水生动物疫病预防控制中心,上海200433;

上海市水产研究所上海市水生动物疫病预防控制中心,上海200433;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
鳜鱼; 传染性脾肾坏死病毒; 荧光定量PCR反应;

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