荧光定量RT-PCR检测雏鸡感染NDV强毒后胸腺和法氏囊中TLR2与TLR4 mRNA的表达

侯巍; 岳华; 汤承

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荧光定量RT-PCR检测雏鸡感染NDV强毒后胸腺和法氏囊中TLR2与TLR4 mRNA的表达

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Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)在识别病原微生物过程中发挥重要作用.为了定量检测TLR2、TLR4 mRNA表达水平,研究病原与机体的相互作用,本研究建立了检测鸡TLR2、TLR4 mRNA表达水平的SYBR Green I荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,检测了新城疫病毒强毒(vNDV)感染SPF雏鸡后36 h、48 h时胸腺、法氏囊中TLR2、TLR4 mRNA表达量变化.结果显示该方法特异性好,RRT-PCR产物分别在85.5℃、83.3℃出现单特异峰,对TLR2、TLR4的扩增效率分别为105.91%和95.30%,相关系数分别为0.9980、0.9996,最低检测限分别为108拷贝/反应和461拷贝/反应.感染后36 h vNDV显著抑制TLR2、TLR4基因在法氏囊、胸腺中的表达;感染后48 h时,法氏囊、胸腺中TLR2基因的表达水平显著升高,胸腺中TLR4基因的表达显著升高,而法氏囊中TLR4基因的表达仍处于抑制状态.本研究证明TLR2和TLR4参与了鸡体对NDV的感染应答.

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来源
《中国预防兽医学报》 |2010年第4期|254-258|共5页
作者
侯巍; 岳华; 汤承;
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作者单位

西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041;

四川省高等院校动物医学重点实验室,四川,成都,610041;

西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041;

四川省高等院校动物医学重点实验室,四川,成都,610041;

西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041;

四川省高等院校动物医学重点实验室,四川,成都,610041;

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正文语种 chi
中图分类家畜病毒学;
关键词
Toll样受体; mRNA; 荧光定量RT-PCR; 新城疫病毒;

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