首页> 中文期刊> 《中国预防兽医学报》 >东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建

东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建

         

摘要

本项研究的目的是构建东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因奠定基础.用TRIzol试剂提取东方田鼠肝脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA.在双链cDNA末端加上EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并用EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切,使其两端分别带EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端.用Mini Column纯化、收集300 bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7 Select 10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库.经测定,库容量为1.3×107 PFU/mL,扩增后文库滴度为1.8×1011 PFU/mL.对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91.7%,阳性克隆片段大小分布在200 bp~1 000 bp,其中有95.5%的插入片段大于300 bp.用日本血吸虫童虫可溶性抗原对文库进行了初筛,得到了21个ESTs,将这些阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中大部分克隆诱导的童虫死亡率比阴性噬菌体对照高出2%~13%.

著录项

  • 来源
    《中国预防兽医学报》 |2008年第1期|5-9|共5页
  • 作者单位

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    上海师范大学,生命与环境科学学院,上海,200234;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

    中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因载体;
  • 关键词

    东方田鼠; 肝脏; T7噬菌体展示cDNA文库;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号